A,树脂的选择及氨基酸的固定
用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺:聚乙烯一乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过?;さ陌被岬聂然髦姆从胖湫纬晒布奂词迪?。
B,氨基、羧基、侧链的?;ぜ巴殉?/p>
要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以?;?,同时对氨基酸侧链上的活性基团也要?;?,反应完成后再将?;せ懦ィ昀?,FMOC合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行?;ぁ<柞ズ鸵阴ナ侵鸩胶铣芍斜;然某S梅椒?。
C,成肽反应
固相中的成肽反应一般是将两个相应的氨基被?;さ募棒然槐;さ陌被岱旁谌芤耗诓⒉恍纬呻募?,要形成酰胺键,经常用的手段是将羧基活化,变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂(如碳二亚氨)形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。
D,裂解及合成肽链的纯化
BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链?;せ?,FMOC法直接用TFA,有时根据条件不同,其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。
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