国产日产欧美精品-亚洲国产综合久久精品-色综合色国产热无码一-亚洲欧美日本国产,免费观看一区二区三区_在线观看片A免费不卡观看_亚洲а∨天堂久久精品_99久无码中文字幕一本久道

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
上海茁彩生物科技有限公司>供求商機>real-time PCR
real-time PCR
返回列表頁
  • real-time PCR

舉報
貨物所在地: 上海上海
更新時間: 2025-06-17 10:05:03
期: 2025年6月17日--2025年12月17日
已獲點擊: 76
在線詢價收藏產(chǎn)品

(聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

產(chǎn)品簡介

real-time PCR
1、總RNA抽提(槍頭和離心管均經(jīng)過濕熱滅菌,無RNA酶)
1)取勻漿器,加入1ml的Trizol Reagent,置冰上預冷。
2)取100mg組織,加入到勻漿器中。
3)充分研磨直至無可見組織塊。

詳細介紹

real-time PCR

熒光定量PCR實驗步驟:

1、總RNA抽提(槍頭和離心管均經(jīng)過濕熱滅菌,無RNA酶)

1)取勻漿器,加入1ml的Trizol Reagent,置冰上預冷。

2)取100mg組織,加入到勻漿器中。

3)充分研磨直至無可見組織塊。

4)13000g離心10min取上清。

5)加入250 μl,顛倒離心管15s,充分混勻,靜置3min。

6)4℃下13000g離心8min。

7)將上清轉移到一新的離心管中,加入0.8倍體積的異丙醇,顛倒混勻。

8)-20℃放置15min。

9)4℃下13000g離心10min,管底的白色沉淀即為RNA。

10)吸除液體,加入75%乙醇1.5ml洗滌沉淀。

11)4℃下13000g離心5min。

12)將液體吸除干凈,將離心管置于超凈臺上吹3min。

13)加入20μl無RNA酶的水溶解RNA。

14)55℃孵育5min。

 

2、反轉錄(槍頭和PCR均經(jīng)過濕熱滅菌,無RNA酶)

1)取一PCR管,加入含2μg RNA的溶液。

2)加入1μl oligo(dT)15。

3)用無核糖核酸酶的去離子水補足至12μl。

4)于PCR儀上70℃保溫5min,迅速置冰上冷卻。

5)依次加入4μl 5×buffer,2μl 10mM dNTPs,1μl RNA inhibitor和1μl 反轉錄酶,用槍抽吸混勻。

6)于PCR儀上42℃保溫60min,結束后80℃保溫5min滅活反轉錄酶。

 

3、定量PCR1)取0.2ml PCR管,配制如下反應體系,每個反轉錄產(chǎn)物配制3管。2× qPCR Mix 12.5μl7.5μM基因引物 2.0μl反轉錄產(chǎn)物 2.5μlddH2O 8.0μl2)取0.2ml PCR管,配制如下反應體系,每個反轉錄產(chǎn)物配制3管。2×qPCR Mix 12.5μl7.5μM內(nèi)參引物 2.0μl反轉錄產(chǎn)物 2.5μlddH2O 8.0μl3)PCR擴增預變性 95℃,10min循環(huán)(40次) 95℃,15s→60℃,60s溶解曲線 75℃→95℃,每20s升溫1℃4、結果處理ΔΔCT法:A=CT(目的基因,待測樣本)- CT(內(nèi)標基因,待測樣本)B=CT(目的基因,對照樣本)- CT(內(nèi)標基因,對照樣本)K=A-B表達倍數(shù)=2-K

real-time PCR

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
86-021-65681082
在線留言
宝鸡市| 泸水县| 会东县| 西平县| 黑河市| 比如县| 雷山县| 交口县| 济宁市| 乌鲁木齐县| 新闻| 枣庄市| 德阳市| 商河县| 霍城县| 呼玛县| 独山县| 昂仁县| 武陟县| 崇明县| 大埔区| 建德市| 东乌| 略阳县| 兰溪市| 合肥市| 荣成市| 岫岩| 大关县| 虹口区| 万安县| 沁阳市| 揭西县| 清河县| 淄博市| 晋宁县| 哈巴河县| 东乡族自治县| 临高县| 化州市| 乌鲁木齐市|