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凱氏定氮儀可以測蛋白質(zhì)含量嗎?

閱讀:1258        發(fā)布時間:2020-7-2

可以。凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

凱氏定氮法首先將含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱,經(jīng)一系列的分解、碳化和氧化還原反應(yīng)等復(fù)雜過程,后有機(jī)氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮硫酸銨,這一過程稱為有機(jī)物的消化。為了加速和*有機(jī)物質(zhì)的分解,縮短消化時間,在消化時通常加入硫酸鉀、硫酸銅、氧化、過氧化氫等試劑,加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點(diǎn)而加快有機(jī)物分解,除硫酸鉀外,也可以加入硫酸鈉、氯化等鹽類類提高沸點(diǎn),但效果不如硫酸鉀。硫酸銅起催化劑的作用。凱氏定氮法中可用的催化劑種類很多,除硫酸銅外,還有氧化、汞、硒粉、鉬酸鈉等,但考慮到效果、價格及環(huán)境污染等多種因素,應(yīng)用廣泛的是硫酸銅。使用時常加入少量過氧化氫、次氯酸鉀等作為氧化劑以加速有機(jī)物氧化。消化完成后,將消化液轉(zhuǎn)入凱氏定氮儀反應(yīng)室,加入過量的濃氫氧化鈉,將NH4+轉(zhuǎn)變成NH3,通過蒸餾把NH3驅(qū)入過量的硼酸溶液接受瓶內(nèi),硼酸接受氨后,形成四硼酸銨,然后用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,直到硼酸溶液恢復(fù)原來的氫離子濃度。滴定消耗的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸摩爾數(shù)即為NH3的摩爾數(shù),通過計算即可得出總氮量。在滴定過程中,滴定終點(diǎn)采用甲基紅-次甲基藍(lán)混合指示劑顏色變化來判定。測定出的含氮量是樣品的總氮量,其中包括有機(jī)氮和無機(jī)氮。

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