以下是?人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒?的详细实验使用说明，综合各品牌试剂盒通用操作流程及注意事项整理：

　　BS-1395人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成?

　　预包被微孔板?：抗IDUA抗体包被的96孔或48孔板?。

　　标准品?：浓度梯度为0.156-10 ng/mL(具体以说明书为准)?。

　　检测抗体?：HRP标记的IDUA抗体?。

　　底物溶液?：TMB显色液?。

　　终止液?：酸性溶液(如2M H?SO?)?。

　　洗涤缓冲液?：20-25倍浓缩液，需稀释使用?。

　　二、样本处理?

　　适用样本?：血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞裂解液、组织匀浆等?。

　　预处理要求?：

　　血清/血浆：离心去除杂质(1000×g，15-20分钟)，避免溶血?。

　　组织样本：匀浆后离心取上清?。

　　保存条件?：短期2-8℃，长期需-20℃冻存，避免反复冻融?。

　　三、实验步骤?

　　试剂平衡?：所有组分室温平衡15-30分钟(TMB需避光)?。

　　加样?：

　　标准品/样本每孔加50-100μL，复孔建议?。

　　空白孔加稀释液对照?。

　　孵育?：37℃避光孵育1-5小时(具体时间参考说明书)?。

　　洗涤?：

　　弃液后每孔加洗涤液300μL，静置30秒后拍干，重复5次?。

　　加检测抗体?：每孔加HRP标记抗体100μL，37℃孵育1小时?。

　　显色?：

　　加TMB底物100μL，避光反应10-30分钟(显蓝色)?。

　　加终止液50μL，颜色转为黄色?。

　　检测?：450nm波长测OD值(参考630nm校正)?。

　　四、数据分析?

　　标准曲线?：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，拟合四参数曲线?。

　　浓度计算?：样本OD值代入曲线方程，乘以稀释倍数?。

　　五、注意事项?

　　质量控制?：

　　每板需做标准曲线及复孔，CV%应<10%?。

　　样本OD值超范围时需稀释后重测?。

　　操作细节?：

　　避免板孔干燥，孵育时覆盖封板膜?。

　　加样需精准，建议使用多道移液器?。

　　保存条件?：

　　未用板条密封保存于2-8℃或-20℃?。

　　底物避光，终止液腐蚀性需防护?。

　　六、技术参数?

　　检测范围?：0.156-10 ng/mL(灵敏度0.039 ng/mL)?。

　　精密度?：板内CV<8%，板间CV<10%?。

　　注：以上资料仅供参考，如需具体品牌说明，可联系供应商获取完整文档?。

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