以下是关于?人转铁蛋白受体(TFR/CD71) ELISA试剂盒?的实验使用说明书综合指南，整合了多个高可信度来源的操作要点和注意事项?：

　　BS-1497 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒

　　一、实验原理?

　　采用双抗体夹心法：

　　包被抗体?：微孔板预包被抗人TFR/CD71抗体?。

　　结合反应?：依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体"复合物?。

　　显色检测?：TMB底物在HRP催化下显色(蓝色→黄色)，颜色深度与TFR浓度正相关，450nm波长测OD值?。

　　二、试剂盒组成?

　　预包被微孔板

　　TFR标准品(浓度范围通常为15.63–1000 pg/mL)?

　　HRP标记检测抗体、TMB底物、终止液

　　洗涤缓冲液(20×浓缩液需稀释)?

　　封板膜(一次性使用)?

　　三、样本处理?

　　血清/血浆?：离心(3000×g，10分钟)去除颗粒，避免溶血?。

　　细胞上清/组织匀浆?：离心(1000–3000×g，10分钟)取上清?。

　　保存?：分装后-20℃冻存，避免反复冻融?。

　　四、操作步骤?

　　平衡试剂?：冷藏试剂需室温平衡15–30分钟?。

　　加样?：

　　标准品和样本建议做复孔?。

　　高浓度样本需稀释(计算时乘以稀释倍数)?。

　　孵育?：37℃避光反应，严格计时(通常30–60分钟)?。

　　洗涤?：使用洗板机或手动洗板，拍干?。

　　显色与终止?：

　　加入TMB避光显色(10–15分钟)?。

　　终止后30分钟内检测OD值?。

　　五、注意事项?

　　质量控制?：每次实验需同步绘制标准曲线?。

　　避免污染?：

　　使用一次性枪头，不同批号试剂勿混用?。

　　封板膜不可重复使用?。

　　仪器校准?：定期校验移液器精度(误差≤2%)?。

　　安全处理?：所有废弃物按生物危害物处置?。

　　六、常见问题?

　　洗涤液结晶?：温水浴助溶，不影响效果?。

　　显色异常?：检查底物避光保存及HRP活性?。

　　注：以上资料仅供参考，如需进一步技术支持，可联系供应商获取服务或实验指导?。

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