以下是关于人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒的实验使用说明：

　　BS-1713 人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒 天津本生

　　一、实验原理

　　采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)，通过HRP标记的检测抗体与样本中AT2R结合，经TMB显色后测定吸光度(OD值)，颜色深浅与AT2R浓度呈正相关?。

　　二、试剂盒组成

　　酶标包被板(48T/96T)

　　标准品(冻干粉，需用稀释液重构)

　　检测溶液A/B(HRP标记物)

　　浓缩洗涤液(需30倍稀释)

　　显色液A/B(TMB溶液)

　　终止液?。

　　三、样本处理

　　血清/血浆?：3000rpm离心10-30分钟，避免溶血?;

　　组织匀浆?：加入生理盐水捣碎后离心取上清?;

　　保存?：分装冻存于-20℃，避免反复冻融?。

　　四、操作步骤

　　标准品稀释?：将冻干标准品用稀释液重构，梯度稀释为7个浓度(如5000pg/mL至78pg/mL)?;

　　加样?：每孔加入50μL标准品或样本，37℃孵育30分钟?;

　　洗涤?：弃液后拍干，加洗涤液静置30秒，重复5次?;

　　显色?：加入显色液A/B各50μL，避光反应15分钟?;

　　终止?：加入50μL终止液，立即450nm测OD值?。

　　五、注意事项

　　避免试剂接触金属器械或强氧化剂?;

　　显色时间需严格控制，超过30分钟可能导致背景升高?;

　　浑浊样本需离心澄清后检测?;

　　不同批次试剂组分不可混用?。

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度?。

　　注：以上资料仅供参考，具体请产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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