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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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飽和酚 您選對(duì)了嗎?天津本生

時(shí)間:2023/2/1閱讀:1682
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    飽和酚是分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)的重要實(shí)驗(yàn)品,常用于樣本中DNA的提取、RNA的提取等。

    飽和酚在核酸純化中有2種,一種為Tris飽和酚,故也稱為堿性酚,另一種就是酸性酚,也就是水飽和酚(1)

                                 表1 飽和酚參數(shù)

名稱

別名

pH

外觀

用途

水飽和酚

水平衡酚

<5.0

無色分層溶液

RNA提取

Tris飽和酚

Tris平衡酚

>7.8

黃色分層溶液

DNA提取

 

 

 

 試劑成分的作用:

 

1)用于RNA提取時(shí),則要制備酸性酚,也就是水飽和酚,因?yàn)樵谒嵝詶l件下,RNA被分配于水相,而DNA在有機(jī)相,從而達(dá)到分離獲得RNA的目的。水飽和酚同時(shí)能使蛋白質(zhì)變性、沉淀,從核酸提取液中將蛋白質(zhì)分離除去。

 

2用于DNA提取時(shí),酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,可以使細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)變性析出。  而Tris的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會(huì)形成醌(兩個(gè)苯環(huán)),醌含有強(qiáng)自由基,會(huì)破壞核酸結(jié)構(gòu)。  同時(shí),由于PH值大于7,在堿性環(huán)境中DNA處于水相,RNA處于有機(jī)相。從而分離上清,即可得到DNA。

核酸提取結(jié)果

經(jīng)典提取方法,適用范圍廣,不受樣本限制,不受吸附柱或磁珠吸附能力的影響。

 

提取效率高:專業(yè)技術(shù)質(zhì)檢團(tuán)隊(duì)檢驗(yàn) 

 

1%瓊脂糖濃度的非變性瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行 RNA 品質(zhì)檢驗(yàn)。 樣品與 6×loading Buffer 混勻,在 120 V電壓下電泳。
 


OD260/280

濃度(ng/μL

試劑成分

RNA提取

1.91-2.01

700-860

水飽和酚

DNA提取

1.81-1.89

150~340

Tris平衡酚

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