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如何提高立體顯微鏡的分辨率呢

閱讀:2028        發(fā)布時(shí)間:2019/11/26
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  立體顯微鏡由于試樣被觀察表面與工作臺(tái)表面重合,因此與試樣高度無(wú)關(guān),使用方便,儀器結(jié)構(gòu)緊湊,外形美觀大方,儀器底座支承面積較大,彎臂堅(jiān)固,使儀器的重心較低安放平穩(wěn)可靠,由于目鏡與支承面呈45°傾斜,使觀察舒適。
 
  用于鑒別和分析各種金屬和合金材料的組織結(jié)構(gòu),立體顯微鏡廣泛應(yīng)用在工廠或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行鑄件質(zhì)量的鑒定;原材料的檢驗(yàn)或材料處理后的金相組織分析;以及對(duì)表面噴涂等一些表面現(xiàn)象進(jìn)行研究工作,對(duì)熱處理后的材料作一般金相組織的研究工作。顯微鏡成像清晰,視野寬廣,整體設(shè)計(jì)符合人機(jī)功能,適合長(zhǎng)時(shí)間操作。
 
  人眼的分辨率只有1/10mm,那么比1/10mm小的物體或比1/10mm近的兩個(gè)微小物體的距離,人眼就無(wú)法分辨了。所以出現(xiàn)了從簡(jiǎn)單的宏觀放大鏡到微觀觀測(cè)的光學(xué)顯微鏡,繼而電子顯微鏡。立體顯微鏡的分辨率定義是指在標(biāo)本上能清楚分辨的兩個(gè)小點(diǎn)之間的小距離。其計(jì)算公式為:
 
  D=0.61λ/NA
 
  式中:D為分辨率(um);λ為光源波長(zhǎng)(um);NA為物鏡的數(shù)值口徑(也稱(chēng)鏡口率)。
 
  由公式可得到,立體顯微鏡的分辨率決定于入射光源的波長(zhǎng)以及所匹配物鏡的數(shù)值孔徑。由此可知,提高光學(xué)顯微鏡的方法:
 
  1、增加物鏡的數(shù)值孔徑NA.
 
  數(shù)值孔徑NA=n*sin(u)
 
  式中,n為物鏡與標(biāo)本之間的介質(zhì)折射率;u為物鏡的二分之一孔徑角。因此,從光學(xué)設(shè)計(jì)上適當(dāng)采用較大的孔徑角,或者增大折射率成為常見(jiàn)的提高立體顯微鏡分辨率的方法。一般低倍物鏡如10X以下其介質(zhì)采用空氣,折射率為1,即干燥系物鏡;水浸介質(zhì)是蒸餾水,其折射率為1.33;油浸物鏡介質(zhì)是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52左右,接近透鏡和載玻片的折光率,如Olympus的100X油鏡。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數(shù)高而且由于使用高折射率的介質(zhì),從而提高物鏡的分辨率。
 
  2、降低光源波長(zhǎng)。
 
  可見(jiàn)光較短波長(zhǎng)為390nm,若用此波長(zhǎng)的紫外光作為照明光源,可使光學(xué)顯微鏡的分辨率降低至0.2um。但是由于大多數(shù)普通材料的玻璃會(huì)大量吸收340nm以下波長(zhǎng)的光,紫外光經(jīng)過(guò)大量衰減無(wú)法形成清晰、明亮的圖像。因此不得不使用石英(可透過(guò)低達(dá)200nm的紫外光)、熒石(可透過(guò)低達(dá)185nm的紫外光)等價(jià)格昂貴的材料,并且紫外光顯微鏡不能用肉眼進(jìn)行觀察,甚至受觀測(cè)樣品的限制,再加上昂貴的造價(jià),所以這種提高立體顯微鏡分辨率的方式由于其自身的局限性而不受廣泛應(yīng)用。

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