小反刍兽疫PPR-U/PPR-V/PPR-W荧光PCR试剂盒说明书

通用名称：小反刍兽疫通用型/疫苗株/野毒株（PPR-U/ PPR-V/ PPR-W）三重核酸检测试剂盒（荧光-PCR法）?

英文名称：Triple Nucleic Acid Detection Kit (Fluorescence-PCR) for Small Ruminant Epidemic Gene/Vaccine Strain/Wild Virus Strain (PPR-U/PPR-V/PPR-W)?

二、包装规格  25T/盒、50T/盒

三、预期用途 小反刍兽疫病毒检测试剂盒利用实时荧光PCR原理，定性检测小反刍兽疫病毒，对小反刍兽疫病毒引起的疾病诊断及疗效评估有重要指导意义。

四、小反刍兽疫病毒检测试剂盒原理

   小反刍兽疫病毒检测试剂盒针对小反刍兽疫病毒的高度保守区域设计特异性引物和探针，在反应体系中含小反刍兽疫病毒基因组模板的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出，实现检测结果的定性分析。

六、储存及有效期

避光-20℃以下保存，避免反复冻融，有效期为12个月。

【试剂组成】

名 称 规 格

酶液 50μL×1 管

反应液 1.0mL×1 管

阳性质控品 50μL ×1 管

阴性质控品 250μL ×1 管

注：

1）不同批号试剂不能混用。

2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。

【标本采集】

病死或扑杀禽，取喉气管、脑、胸肌、心肌和肺等组织；待检活禽，用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物，置于 1mL 50%甘油生理盐水中。

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

1.2RNA 提取

推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的RNA 提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作。

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

6.质控标准

阴性质控品：无明显扩增曲线且无 Ct 值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

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