牛副流感病毒3型(BPIV-3)荧光PCR检测试剂盒?说明书

【产品名称】

通用名称：牛副流感病毒3型(BPIV-3)核酸扩增检测试剂盒(PCR 荧光探针法)

Name ：Bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3) nucleic acid amplification kit (PCR fluorescent probe method)

【包装规格】48T/盒

【预期用途】

本试剂盒适用于检测全血等样本中的牛副流感病毒3型(BPIV-3)，用于牛副流感病毒3型(BPIV-3)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

【检验原理】

本试剂盒用一对牛副流感病毒3型(BPIV-3)特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对牛副流感病毒3型(BPIV-3)的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

【储存条件和有效期】

试剂盒保存于-20±5℃，有效期 12 个月；

避免反复冻融，冻融次数不超过 5 次；试剂开瓶后，在室温条件下放置时间不

应超过 8 小时；运输采用干冰（或者冰袋）保持低温，运输时间不应超过 4 天。试

剂盒生产日期见产品标签。

【适用仪器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他荧光定量 PCR 检测仪。

【标本要求】

标本采集：用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管

保存运输：上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过

6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

【使用方法】

1.1样本前处理1. 样品处理（样本处理区）

取抗凝血下层血细胞 50uL，加入 100uL 双蒸水吹匀

1.2DNA 提取

1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液（固体标本加入50uL核酸提取液），

100℃恒温处理 10 分钟，13,000 rpm 离心 5 分钟，取上清液转移至新的 1.5ml

EP 管，-20℃保存；

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂

盒（离心柱提取法），请严格按照试剂盒说明书进行操作。

2. 试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性

对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

试剂 YP 反应液 酶液

用量（样本数为 N） 20μl 1μl

3. 加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μl，分别加入相应的反

应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

4. PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25ul；

荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）

NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。

5. 结果分析判定

5.1结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出

现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围

内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上

下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

5.2结果判断

阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线；

可疑：检测通道 35.0<Ct 值≤37，建议重复检测，如果检测通道仍为 35.0<Ct

值≤37，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；

阴性：样本检测结果 Ct 值>37 或无 Ct 值。

7. 质控标准

阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32；

以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

8. 产品性能指标

阴阳性参考品符合率：8 份阳性参考品符合率为 100％；10 份阴性参考品符合

率为 100％。

低检测限：2.0×102copies/ml。

精密度：批内、批间精密度检测 Ct 值的变异系数（CV）均≤3%。

公司优势：
1）质量：我司提供的的试剂为世界
2）价格：价格实惠，量大从优。
4）服务：提供完整的售前、售后和售中服务。售后到底

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