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檢測試劑盒在保存中有哪些注意事項
檢測試劑盒是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法簡單，方便，靈敏，特異性強(qiáng)且不需要特殊設(shè)備(只需要酶標(biāo)儀就可以)，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。
檢測試劑盒是通過酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)檢測特定物質(zhì)的試劑盒。檢測試劑盒中會有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，它們會與酶標(biāo)簽條中的固相抗原或抗體、酶標(biāo)記抗原或抗體以及酶底物發(fā)生反應(yīng)。可以形成標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定試樣。
(1)檢測試劑盒要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。檢測試劑盒標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可。
(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。Elisa試驗是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。