BNCC菌種測序名錄-中昌國研標(biāo)物

細(xì)胞分選技術(shù)有新突破啦！

細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。但在細(xì)胞培養(yǎng)過程中也難免遇到這樣那樣的問題，就比如常見的細(xì)胞密度不均勻問題就很令人頭疼，那又該怎么辦呢？

下面便是小編為大家整理的幾點(diǎn)關(guān)于細(xì)胞分布不均的實用經(jīng)驗：

1、盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。

2、96孔板一般以100 微升每孔接種，直接用100 微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需*打到大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。

3、6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。

4、培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。