Rosetta-gami 2(DE3)
Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell

产品编码：                       保存条件： -80℃   
产品规格:

Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞基因型：
D(ara-leu)7697 DlacX74 DphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F’[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pRARE2 (CamR, StrR, TetR)

Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞简要说明：
Rosetta-gami 2(DE3) 菌株集合了Rosetta 2 和 Origami 2 两种菌株的优点： ＊ pRARE2赋予其Rosetta2菌株的优点——补充大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。 --
＊ gor522::Tn10 trxB赋予其Origami2菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性；同时该菌株不具有卡那霉素抗性，可用于具有卡那霉素抗性质粒的蛋白表达。-- 
＊ 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)适合T7启动子诱导的蛋白表达。 ＊ --Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有氯霉素，链霉素，四环素抗性，由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108 cfu/μg DNA。


Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞操作说明：

1. Rosetta-gami 2(DE3)菌株感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。--
2. 2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。--
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含所选质粒筛选抗生素的2YT或LB培养基上。--
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。--