BL21(DE3)pLysS感受态细胞基因型：

F^- ompT hsdS(r_B^-m_B^-) gal dcm(DE3)pLysS Cam^r

BL21(DE3)pLysS感受态细胞简要说明：

 BL21(DE3)pLysS 感受态细胞携带 pLysS质粒，具有氯霉素抗性。
pLysS含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶）， BL21(DE3)pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达10⁸cfu/μg。
 

BL21(DE3)pLysS感受态细胞操作说明：

1.  取100μl冰上融化的 L21(DE3)pLysS感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34 µg/ml氯霉素及所选质粒筛选抗生素的2YT 或LB培养基上。

1. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

BL21(DE3)pLysS感受态细胞注意事项：

1.   感受态细胞在冰上融化。
2.  混入质粒时应轻柔操作。
3.  转化高浓度的质?？上嘤跎僦沼糜谕堪宓木?。
4.  诱导时，IPTG浓度可?。?.1-2mM均可）。
5.  为获得需要量的蛋白，诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

6. BL21(DE3)pLysS 菌株携带 pLysS质粒，除复苏培养基为无抗生素外，其余所用培养基、培养液均应含有34 µg/ml氯霉素，以防质粒丢失。

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