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日本生研荚膜型流感菌检测用免疫血清（a-f型）

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广州健仑生物有代理日本生研、丹麦SSI、德国Sifin、泰国血清：

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、乙肝、寨卡、黄热病、黑热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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6、实验人员：戴一次性口罩、 帽子、手套，实验过程中手套要勤换。
7、设置RNA操作实验室，所有器械等应为。
二、常用的RNA酶抑制剂
1、焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不*的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。
2、硫氰酸胍：目前被认为是有效的RNA酶抑制剂，它在裂解组织的同时也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来，又对RNA酶有强烈的变性作用。
3、氧钒核糖核苷复合物：由氧化钒离子和核苷形成的复合物，它和RNA酶结合形成过渡态类物质，几乎能*抑制RNA酶的活性。
4、RNA酶的蛋白抑制剂（RNasin）：从大鼠肝或人胎盘中提取得来的酸性糖蛋白。RNasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂，可以和多种RNA酶结合，使其失活。
5、其它：SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定抑制作用。
在利用昆明鼠或BALB/c鼠进行免疫的时候，不论是用来制备单克隆抗体还是检测目的蛋白的抗原性都可以使用与制备单抗相同的免疫方案。常用的多肽或蛋白类抗原腹腔免疫小鼠的方式和免疫剂量：
1、*免疫用50ug抗原（可溶性的）溶解于100或150ul的生理盐水或是PBS，加入等量的弗氏*佐剂充分乳化后进行小鼠腹腔注射，注射体积不超过0.5ml/只小鼠。
2、两周后，用同样的剂量和同样的抗原进行腹腔免疫，通常情况下这次免疫佐剂为弗氏不*佐剂，但也有用弗氏*佐剂。

3、三周后用50ug抗原溶解于100或150ul的生理盐水或是PBS，加入等量的弗氏不*佐剂充分乳化后腹腔注射。

4、两周后50-80ug的抗原加入生理盐水到200ul行腹腔注射，三天后尾静脉取血测效价确定下一步实验方案。

抗原与佐剂的乳化

抗原乳化前，应检查抗原管有否颗粒状沉淀，如有沉淀，应超声粉碎后再用。用2-5ml注射器，取含抗原的溶液，另一支注射器?。ǖ忍寤└Ｊ?佐剂或不*佐剂，用不锈钢连接接头连接，反复推拉混合约10-30分钟，平放静置30分钟，如水乳相不再分离，即乳化*，可注射小鼠。
环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP）是Notomi等于2000年开发的一种恒温核酸扩增方法。其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在等温条件(65℃左右)保温几十分钟，即可完成核酸扩增反应。不需要模板的热变性、长时间温度循环、繁琐的电泳、紫外观察等过程。LAMP 是一种崭新的DNA扩增方法，具有简单、快速、特异性强的特点，具有替代PCR方法的可能性

LAMP PCR

温 度 反应全程恒温 必须要有热循环

时 间 约１５～６０分钟 ２～３小时

产 物 量 约１０^１０倍 (100亿倍) 约１０^７倍 (1千万倍)

特 异 性 *，６区域 ４ 引物 ２区域 ２ 引物

检 测 无需其他检测步骤，根据扩增反应发生与否判断 需其他检测步骤，如电泳

试 剂 无需特殊试剂 无需特殊试剂

一、环介导等温扩增技术（LAMP）的原理