SRM1649b標準品作用于皮膚角質(zhì)形成細胞HaCaT細胞及皮膚成纖維細胞(NHDF),檢測分析其老化相關(guān)分子標志、信號通路的分子及基因表達水平,旨在探索PM2.5的空氣顆粒性污染物中的多環(huán)芳烴化合物是否引起正常人表皮角質(zhì)形成細胞及皮膚成纖維細胞老化的作用,明確多環(huán)芳烴化合物引起皮膚細胞老化的具體分子機制。
純度測定：
?. 配同等濃度的溶液，用已知含量的標準品標定自己純化標準品的純度。SRM1649b標準品經(jīng)MS離子化后，檢測的主要色譜峰即為目標化合物的色譜峰，水分、重金屬、其他結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)即使保留時間一樣也不會出峰干擾，結(jié)果比較可靠。
?. LC-MS進樣后檢測總離子流，有機雜質(zhì)可以產(chǎn)生色譜峰，該色譜峰在保留時間上與目標化合物色譜峰的保留時間會有差別，從而可以觀察標準品的純度問題。一些在DAD上不響應(yīng)的雜質(zhì)，在MS上會出峰，從而使測定的結(jié)果更準確。但也存在一個問題，不同化合物離子化效率不同，同樣的濃度會產(chǎn)生不同的峰面積。
?. LC-MS可以測定SRM1649b標準品的純度，但必須有對照品進行比較，用已知含量的標準品外標法確定自己標準品的量值，然后換算成純度，屬于外標法定量的一種，主要能避免DAD測定純度過程中雜質(zhì)帶來的干擾。
?. 其實使用LC/MS技術(shù)也不能*保證準確測定純度，LC/MS測定由于會受所采用離子化技術(shù)的限制。樣品中某些雜質(zhì)可能在所使用離子化技術(shù)下不能離子化或者離子化效率很低，導(dǎo)致該雜質(zhì)不能檢測到，測定純度無法實現(xiàn)，當然如果所測雜質(zhì)和主成分相關(guān)，一般可采用與主成分相同的離子化方法，結(jié)合適合的色譜分離方法測定。