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重組蛋白表達(dá)的分泌途徑:從細(xì)胞內(nèi)到細(xì)胞外
重組蛋白表達(dá)的分泌途徑是一個(gè)復(fù)雜但精確的過程,主要涉及將蛋白質(zhì)從細(xì)胞內(nèi)合成并運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞外。以下是這一過程的主要步驟:一、重組蛋白的合成1.基因構(gòu)建與載體選擇首先要通過基因工程技術(shù),將編碼目標(biāo)蛋白的基因克隆到合適的表達(dá)載體中。這個(gè)載體通常包含啟動(dòng)子、信號(hào)序列編碼區(qū)、多克隆位點(diǎn)和篩選標(biāo)記等元件。啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的DNA序列,它決定了基因的表達(dá)水平和表達(dá)時(shí)機(jī)。信號(hào)序列編碼區(qū)編碼一段特定的氨基酸序列,這段序列能夠引導(dǎo)新合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入分泌途徑。2.轉(zhuǎn)錄與翻譯當(dāng)表達(dá)載體被導(dǎo)入宿主細(xì)胞后, -
高效低毒Lipo2000(脂質(zhì)體2000)轉(zhuǎn)染試劑及MEM減血清培養(yǎng)基
高效低毒Lipo2000(脂質(zhì)體2000)轉(zhuǎn)染試劑及MEM減血清培養(yǎng)基一、Cetrans2000脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑Cetrans2000脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑是一種高轉(zhuǎn)染效率、低細(xì)胞毒性、實(shí)現(xiàn)RNA/DNA共轉(zhuǎn)染的多功能轉(zhuǎn)染試劑,能夠代替進(jìn)口Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑。本產(chǎn)品具有專有配方,其在質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染以及基于siRNA和shRNA的基因敲除實(shí)驗(yàn)、基因表達(dá)研究方面有著出色的轉(zhuǎn)染性能。用慣了進(jìn)口lipo2000轉(zhuǎn)染試劑的小伙伴們,什么都不用改,體系照舊,用法一樣!價(jià)格超級(jí)優(yōu)惠!二、Cetrans60 -
賽爾瑞成預(yù)染蛋白Marker (10-180 kDa)加強(qiáng)了條帶亮度,也增強(qiáng)了抗洗膜能力
蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn),常稱為蛋白Marker,是蛋白電泳及免疫印跡實(shí)驗(yàn)的工具。蛋白Marker不僅提示蛋白電泳是否正常進(jìn)行,也能夠確定轉(zhuǎn)膜是否成功。目前常用的蛋白Marker分為非預(yù)染蛋白Marker和預(yù)染蛋白Marker。非預(yù)染蛋白Marker最先在實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn),它是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預(yù)混液(目標(biāo)分子量也在這個(gè)范圍內(nèi))。因?yàn)殡娪具^程中看不到,要和目標(biāo)蛋白一起等到最后經(jīng)過染色脫色后才能起指示作用,無法在實(shí)驗(yàn)中起預(yù)示作用,使用起來很不方便。預(yù)染蛋白Marker可用于在電泳進(jìn)程中輕松識(shí)別和監(jiān)測(cè)蛋 -
賽爾瑞成超微量快速蛋白染膠液比傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)染色液更快速更安全!
做過蛋白電泳的同學(xué)都知道,使用傳統(tǒng)的考馬斯亮藍(lán)染色,蛋白電泳膠的染色、脫色是非常耗時(shí)的程序,染色1-2小時(shí),脫色往往需要搖床過夜。對(duì)于期待盡快看到結(jié)果的我們,是漫長(zhǎng)的等待。賽爾瑞成的兩款快速蛋白膠染色液:快速蛋白染膠液和超微量快速蛋白染膠液,均能夠?qū)崿F(xiàn)“2分鐘-10分鐘染色,無需脫色”的效果,快速顯現(xiàn)我們期待的數(shù)據(jù)結(jié)果。對(duì)比傳統(tǒng)的考馬斯亮藍(lán)染色液,不僅快速,且不含甲醇乙酸,安全無毒,靈敏度高,可用于SDS-PAGE膠(變性)及Native膠(非變性),也可以用于Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘 -
在利用大腸桿菌進(jìn)行蛋白制備的實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)過程中,大腸桿菌的裂解是獲取蛋白質(zhì)的關(guān)鍵步驟。然而,傳統(tǒng)的破菌方法如超聲破碎、高壓均質(zhì)、反復(fù)凍融往往存在操作復(fù)雜、設(shè)備依賴性強(qiáng)、破碎效率低、成本高、周期長(zhǎng)、細(xì)胞破碎不均一等缺點(diǎn)。為此,我們?cè)诖竽c桿菌專用破菌液(貨號(hào):PR0202)的基礎(chǔ)上,經(jīng)過大量試驗(yàn)優(yōu)化,開發(fā)出一款成分溫和、使用簡(jiǎn)便、無需超聲和凍融、不添加溶菌酶的裂析大腸桿菌超級(jí)破菌液,革新了傳統(tǒng)破菌方式,既能滿足實(shí)驗(yàn)室規(guī)模高通量篩選和小量測(cè)試需要,又適用于工業(yè)級(jí)別蛋白純化需求。我們把裂析大腸桿菌超級(jí)破菌
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重組人BMP2在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用
重組人BMP2在實(shí)驗(yàn)室中有著廣泛而重要的應(yīng)用,主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:一、細(xì)胞生物學(xué)研究細(xì)胞分化BMP2可以誘導(dǎo)多種細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化。在干細(xì)胞研究中,將重組人BMP2加入到干細(xì)胞培養(yǎng)體系中,能夠啟動(dòng)干細(xì)胞向成骨方向的分化程序。例如,間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)在BMP2的作用下,會(huì)逐漸表達(dá)成骨細(xì)胞特異性基因,如堿性磷酸酶(ALP)、骨鈣素(OCN)等。通過檢測(cè)這些基因和蛋白的表達(dá),可以深入研究細(xì)胞分化的分子機(jī)制。對(duì)于成纖維細(xì)胞等非骨骼來源的細(xì)胞,BMP2也能在一定程度上誘導(dǎo)其向成骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化。這種 -
1、使用賽多培®噬菌體抑制劑與現(xiàn)有噬菌體防治手段相比有哪些優(yōu)勢(shì)?在生物醫(yī)藥(抗生素、疫苗、蛋白藥物、基因治療載體)、工業(yè)酶制劑、生物反應(yīng)器工藝研究等依賴大規(guī)模細(xì)菌培養(yǎng)的領(lǐng)域,傳統(tǒng)防治噬菌體的方法(如設(shè)備消毒、菌種輪換)成本高且無法預(yù)防噬菌體污染,如果一旦發(fā)生噬菌體污染,會(huì)導(dǎo)致批次發(fā)酵失敗,造成大量物料損失和人工成本的浪費(fèi)。傳統(tǒng)噬菌體消殺步驟繁瑣,且需要耗費(fèi)大量時(shí)間,影響研發(fā)和生產(chǎn)進(jìn)度。賽多培®噬菌體抑制劑可以作為細(xì)菌培養(yǎng)的保護(hù)劑使用,盡最大可能保證發(fā)酵成功率,避免物料損失,同時(shí)減輕了環(huán)境消殺等成
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重組人BMP2的制備方法通常包括以下步驟:1.基因工程手段:首先,將編碼BMP-2的基因插入到表達(dá)載體中,然后將其轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞,如大腸桿菌,使宿主細(xì)胞能夠表達(dá)BMP-2。2.蛋白表達(dá):在適宜的培養(yǎng)條件下,使轉(zhuǎn)入基因的細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,大規(guī)模生產(chǎn)BMP-2蛋白。3.細(xì)胞破碎與包涵體提?。和ㄟ^高壓勻漿等方法破壞細(xì)胞壁,收集并漂洗包含BMP-2的包涵體。4.變性與復(fù)性:使用尿素等變性劑使蛋白復(fù)性,通過控制pH值和尿素濃度,以及應(yīng)用超濾膜技術(shù),使變性的BMP-2蛋白重新折疊恢復(fù)活性。5.純化:采用離子交換層