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生命科学: 宏石实时荧光定量PCR BioRad伯乐PTC Tempo梯度pcr 细胞破碎仪赛默飞240i二氧化碳CO2培养箱赛默飞311二氧化碳CO2培养箱赛默飞371二氧化碳CO2培养箱赛默飞i160二氧化碳CO2培养箱赛默飞NanoDropOneC紫外光度计赛默飞NanoDropOne紫外光度计艾本德Mastercycler® X50s PCR 赛默飞Qubit Flex分光光度计赛默飞细胞计数光立方赛默飞VeritiPro PCR仪赛默飞QuantStudio7 赛默飞QuantStudio5 PCR 赛默飞QuantStudio3 PCR 伯乐CFX Connect PCR仪伯乐S1000 PCR仪伯乐C1000 Touch PCR 仪伯乐CFX Opus 96 PCR 伯乐CFX Duet荧光定量PCR 伯乐CFX Opus Deepwell 伯乐TC20细胞计数器赛默飞QuantStudio1 PCR 赛默飞StepOnePlus实时荧光定量PCR 赛默飞7500实时荧光定量PCR 赛默飞ProFlex 3x32梯度PCR 赛默飞SimpliAmp PCR仪赛默飞MiniAmpPlus PCR仪赛默飞MiniAmp普通PCR仪赛默飞Qubit4.0分光光度计赛默飞Countess™ 3细胞计数仪赛默飞Countess™ 3FL细胞计数仪伯乐T100 光度计蛋白印迹仪凝胶成像系统 PCR仪酶标仪洗板机电穿孔仪样本破碎 DNA测序仪细胞计数仪电泳仪电泳槽伯乐T100梯度PCR仪核酸定量仪荧光计实时荧光定量PCR仪

实验通用: 艾本德5810微量离心机冷冻离心机赛默飞CryoExtra液氮罐赛默飞Sorvall LYNX 6000 离心机赛默飞Sorvall LYNX 4000离心机赛默飞1500系列生物安全柜赛默飞1300系列安全生物柜赛默飞4111FO水套式CO2培养箱赛默飞311 CO2培养箱赛默飞371直热式CO2培养箱赛默飞3111水套式CO2培养箱赛默飞i160直热式CO2培养箱艾本德5804R冷冻离心机赛默飞ST4R冷冻离心机赛默飞ST4离心机赛默飞Micro21R冷冻离心机赛默飞Micro21微量离心机赛默飞Micro17微量离心机精骐摆床精骐混匀仪精骐干式恒温器精骐振荡器/摇床 CryStal精骐振荡器/摇床赛默飞ST40离心机赛默飞ST1 Plus离心机大龙离心机大龙移液器大龙金属浴大龙摇床大龙混匀仪振荡器凯杰样本研磨仪TissueLyser III 艾本德5430R冷冻离心机艾本德5425R冷冻离心机艾本德5425微量离心机艾本德5420微量离心机艾本德MiniSpin离心机离心机转子转头赛默飞ST1R冷冻离心机加热?？?/a> 混匀仪热盖赛默飞mySPIN-6Mini离心机赛默飞ST8R冷冻离心机赛默飞Pico21微量离心机赛默飞Pico17微量离心机艾本德5810R冷冻离心机艾本德ThermoMixer C混匀仪赛默飞Micro17R冷冻离心机赛默飞Fresco17冷冻离心机赛默飞Fresco21冷冻离心机电子天平水分测定仪电导率仪磁力搅拌器标准培养箱电阻仪二氧化碳培养箱浓缩仪分光光度计分度计低温冰箱程序降温仪酸度计PH计储存液氮罐摇床小型台式离心机灭菌锅水分仪天平万分之一药品冷藏箱恒温振荡器混匀搅拌器超净工作台电化学仪器生化培养箱干燥箱烘箱恒温水浴锅光谱色谱仪

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赛默飞abi7500实时荧光定量PCR仪操作方法

时间：2025/7/14阅读：211

赛默飞（Thermo Fisher）7500实时荧光定量PCR仪（7500 Real-Time PCR System）的基本操作使用方法，供参考：

一、开机准备

1、仪器检查

确认电脑与7500主机连接正常，电源线、数据线无误。

检查散热模块（如风扇）无遮挡。

2、开机顺序

先打开电脑，待系统启动后，再开启7500主机电源（主机开关位于背面或侧面）。

3、启动软件

双击桌面上的 "7500 Software v2.x"（版本号可能不同）进入操作界面。

二、7500pcr实验设置

1、创建新实验

点击 "New Experiment"，选择实验类型（如Standard Curve、Comparative Ct等）。

设置反应体积（通常为20-50 μL）和检测通道（FAM/SYBR Green, VIC/HEX等）。

2、设置反应板布局

在软件界面中点击板图（Plate Layout），右键选择样品类型（标准品、待测样品、阴性对照等）。

输入样品名称、浓度（标准品需设置梯度）和重复数。

3、设置PCR程序

预变性阶段：95℃, 10分钟（激活热启动酶）。

扩增循环（40-45个循环）：

变性：95℃, 15秒

退火/延伸：60℃, 1分钟（温度根据引物TM值调整）。

熔解曲线阶段（SYBR Green实验需添加）：

95℃→60℃→95℃，缓慢升温（如0.3℃/秒）。

三、加样与上机

1、准备反应体系

按试剂盒说明书配制Master Mix（含酶、dNTPs、缓冲液等），加入模板DNA和引物/探针。

混匀后分装至96孔或384孔反应板，避免气泡。

2、放置反应板

将反应板放入仪器样品槽，确保孔位方向与软件板图一致。

关闭仪器盖，确保密封。

四、运行程序

1、启动运行

在软件中点击 "Start Run"，确认反应板信息和程序无误后提交。

仪器将自动运行温控和荧光信号采集。

2、实时监控

在运行过程中可查看扩增曲线、荧光阈值（Threshold）和基线（Baseline）设置。

五、数据分析

1、查看结果

运行结束后，软件自动生成扩增曲线、熔解曲线（如设置）和Ct值。

调整基线范围（通常为3-15个循环）和阈值线至指数扩增期。

2、导出数据

点击 "Export" 导出Ct值、荧光数据为Excel或文本格式。

使用软件内置工具或第三方软件（如GraphPad）进行相对定量（ΔΔCt法）或绝对定量（标准曲线法）。

六、关机与维护

1、关机顺序

先关闭软件，再关闭7500主机电源，最后关闭电脑。

2、清洁维护

定期用70%乙醇擦拭样品槽表面，避免污染。

每月运行一次仪器自检程序（可在软件中找到）。

如需更详细的操作步骤，建议参考《Thermo Fisher 7500 User Manual》或参加培训。不同实验（如基因表达分析、SNP检测）可能需要调整具体参数。

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赛默飞abi7500实时荧光定量PCR仪操作方法

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