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單克隆篩選的幾種方法介紹

閱讀:1977        發(fā)布時間:2020-10-26
  單克隆篩選是新一代細胞克隆篩選和挑取技術,細胞克隆篩選系統(tǒng)能夠更少時間里,自動化篩選并挑取更高水平表達的細胞克隆,擁有5組熒光通道,可以同時使用3組,細胞克隆篩選系統(tǒng)避免有限稀釋,快速高效篩選挑取雜交瘤克隆,建立穩(wěn)定細胞株,干細胞及特殊表面標記細胞挑取及昆蟲細胞篩選挑取。
  單克隆篩選方法有有限稀釋法,半固體培養(yǎng)基挑選法,以及流式細胞術挑選法等。這其中有好多需要關注的點,例如挑選細胞的參數(shù),挑選方法本身對細胞的損傷等。所以說,一個高效的篩選方法能讓工作效率提高好幾倍。
  有限稀釋法是目前常用的一種常規(guī)武器,這種方法篩選細胞的好處就是基本上不會傷害細胞。整個過程中細胞所經歷的,也僅僅是在移液槍頭中的短暫停留,因此幾乎是零損傷。不過,這種方法的弊端也是顯而易見,就是效率問題。首先是鋪板效率,雖然不到一分鐘能將一塊96孔板鋪滿,但是一般來說96孔中有細胞的概率在2/3左右,其中單個細胞的概率就更小了,這些細胞要經過一段時間的生長,抗體分泌之后,在其上清液中去檢測抗體含量,流程耗時太長,且效率低下,但是在沒有更先進的設備的時候,這還是目前好的選擇。
  流式細胞分選儀是挑選細胞的不二法寶,在細胞分析分選當中占有重要一席。在很多抗體研發(fā)企業(yè)中,也都有用到流式細胞儀來挑選高產細胞株,在這一應用領域有其*優(yōu)勢,分選快速(每秒上萬個細胞)。

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