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單細胞分離的關鍵技術有哪些?

閱讀:579        發(fā)布時間:2020-5-13
  相信許多實驗人員,都見過傳統(tǒng)的單細胞分離設備,傳統(tǒng)的分離方法主要有:口吸管技術、顯微操作法、激光顯微切割法及流式細胞法。
  操作者可以將組織內單一細胞或細胞群切割下來進行研究,避免間質細胞及一些炎癥細胞造成背景“污染”,可以了解到細胞的位置信息。但該方法相鄰細胞容易污染,另外在組織固定及激光切割的過程中可能會破壞細胞的完整性,對細胞核酸損傷較大,從而影響后續(xù)的遺傳物質的擴增。
  分離微流控技術
  利用口吸管技術,操作者可以在顯微鏡下選擇形態(tài)較好的細胞,對細胞幾乎無損傷,因此下游實驗的成功率高,但對操作人員的熟練度要求較高。
  是指通過微米級別的流道精確操控微升、毫升級別樣品的技術,目前主要有微反應室、液滴技術。微流控技術在細胞分選應用方面優(yōu)勢巨大,可利用重力離心、流體力學、電場力等來捕獲細胞,同時還可以將多種操作單元結合在一起,集細胞捕獲、細胞培養(yǎng)、細胞裂解及后續(xù)的檢測分析于一體,實現高通量、自動化、集成化。
  單細胞分離關鍵技術:
  單核液滴 (液滴只含一個細胞/菌/酶...刪除空液滴,去除雜質);
  激光切換 (可選雙激光, 自由切換, 后續(xù)可靈活升級更換);
  柔性篩選 (液滴高通量柔性篩選過程對細胞/菌活性影響很小);
  耗材定制 (耗材按客戶不同應用需求定制, 價格遠低于進口 );
  檢測速度:300萬個液滴/8小時;  篩選速度:150萬個液滴/8小時)。

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