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單細(xì)胞鋪板的三種手法
閱讀：836 發(fā)布時(shí)間：2020-2-14
單細(xì)胞鋪板手法一：均勻單層。要鋪成那種很均勻的單層細(xì)胞，手法如下：
1，細(xì)胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min。
2，在滴入細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞板子與通風(fēng)櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。
3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。
4，置于水平臺(tái)上，放置10-20分鐘
5，放入孵箱。在細(xì)胞鋪板時(shí)，每一種板子的孔面積有多大，培養(yǎng)的液體量以及加入細(xì)胞量。
手法二：中間少，周?chē)?。其?shí)細(xì)胞鋪板不一定都需要單個(gè)單個(gè)的那么均勻，比如，做免疫熒光時(shí)，學(xué)霸姐姐喜歡鋪中間少，周?chē)远嗟陌遄樱驗(yàn)檫@個(gè)樣子可以同時(shí)檢測(cè)到單個(gè)細(xì)胞的形態(tài)，另外又可以照一點(diǎn)低倍的用作于統(tǒng)計(jì)，所有的細(xì)胞都在一個(gè)環(huán)境中。
要鋪這樣的細(xì)胞樣子，那鋪細(xì)胞時(shí)要注意手法了：
1，細(xì)胞板子不需要提前用培養(yǎng)基潤(rùn)洗，直接從邊上滴入混有細(xì)胞的培養(yǎng)基。
2，放置30s-1min后，前后搖晃5-8次。
3，放在水平臺(tái)上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
其實(shí)在單細(xì)胞鋪板的時(shí)候，你要準(zhǔn)確的知道你所養(yǎng)的細(xì)胞的特性，比如：
1，細(xì)胞的名稱，來(lái)源。2，細(xì)胞的屬性。3，細(xì)胞分裂時(shí)間。
細(xì)胞鋪板后，細(xì)胞狀態(tài)不好怎么辦？
如果出現(xiàn)這種情況，學(xué)霸姐姐建議你從以下幾個(gè)方面考慮一下原因：
1，用來(lái)鋪板的細(xì)胞狀態(tài)本身就不好。2，用來(lái)鋪板的細(xì)胞傳代次數(shù)太多，有些老化。3，胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。4，中和的血清量及時(shí)間不夠。5，支原體污染。
細(xì)胞鋪板是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)積累的過(guò)程，你的手法也需要積極的改進(jìn)，不要生搬硬套，也不要一味追求的鋪均勻，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中多思考細(xì)胞本身的特征和屬性，出現(xiàn)問(wèn)題積極解決即可。