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上海單細(xì)胞分離巧妙的新方法在不斷涌現(xiàn)

閱讀:629        發(fā)布時間:2019-6-25
   上海單細(xì)胞分離巧妙的新方法在不斷涌現(xiàn) 
   上海單細(xì)胞分離是單細(xì)胞研究中困難的步驟之一,目前的單細(xì)胞分離策略主要分為三類:手動分離、熒光激活的細(xì)胞分選和微流體技術(shù)。
   在進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析之前,我們需要確定自己拿到了正確的細(xì)胞。如果你想要的細(xì)胞已經(jīng)處于懸浮狀態(tài)(比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞),而且含量相對比較豐富,那么流式細(xì)胞分析將是你的理想選擇。如果樣本是實(shí)體組織,我們可以用酶分解掉膠原和其他細(xì)胞外蛋白。不過酶學(xué)消化對細(xì)胞影響較大,甚至可能改變基因轉(zhuǎn)錄情況。把組織細(xì)胞制成懸液之后,我們就可以通過特異性的熒光標(biāo)簽分離出自己想要的細(xì)胞。進(jìn)一步拿到單細(xì)胞是比較棘手的一步,可能需要用到微流體設(shè)備。
   將細(xì)胞分散到懸液中,會失去它們在組織里的位置信息。如果你想要了解單細(xì)胞所處的環(huán)境,就得使用激光捕獲顯微切割技術(shù),上海單細(xì)胞分離通過掃描組織切片定位目的細(xì)胞,并將其提取出來。操作者需要非常小心,以免切到細(xì)胞或細(xì)胞核。數(shù)量為的細(xì)胞只能用毛細(xì)管等器具手動獲取。離法的難度與細(xì)胞或個體的大小成反比,較大的微生物如藻類、原生動物較容易,個體較小的細(xì)菌則較難。
   在顯微鏡下使用單孢子分離器進(jìn)行機(jī)械操作,挑取單孢子或單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來,然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。上海單細(xì)胞分離對操作技術(shù)有比較高的要求,多限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究中采用。當(dāng)然,除了成熟的方法,巧妙的新方法也在不斷涌現(xiàn),能以更高的準(zhǔn)確性和特異性來分離單細(xì)胞。
 

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