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單細胞挑選的使用范圍越來越廣闊
閱讀：597 發(fā)布時間：2019-5-6
單細胞挑選的使用范圍越來越廣闊
單細胞挑選顯微操作法是通過鏡檢，對單個細胞進行人工挑選的方法，在制備好適宜濃度的細胞懸浮液后，可置于顯微鏡下觀察，利用口吸管（可由玻璃毛細管拉制而成）將目標細胞吸取出來。條件允許的話，還可使用顯微操作儀，該儀器對口吸管、注射儀、毛細針有一定的固定、調(diào)節(jié)功能，可在一定程度上增加操作的通量以及穩(wěn)定性。
如果對通量要求較高，同時目標細胞有適宜的熒光標記，可利用流式細胞儀完成單細胞挑選。經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液，被高壓壓入流動室內(nèi)，在鞘液的包裹和推動下，細胞被排成單列，以一定速度從流動室噴口噴出。單細胞挑選通過相應(yīng)熒光檢測及充電，獲得目的細胞，實現(xiàn)單細胞分離。進行免疫方面的研究時，流式細胞為分離單細胞方法的選擇。
單細胞挑選利用非均勻電場對細胞施力，并結(jié)合形態(tài)學(xué)的信息，實現(xiàn)單個細胞的捕獲、操控和回收。整個過程無物理接觸或摩擦，保持了細胞活性，這樣獲得的細胞可以繼續(xù)培養(yǎng)或者應(yīng)用于表達譜、測序、拷貝數(shù)變異等分析。單細胞挑選系統(tǒng)可分析包含一個至數(shù)萬個細胞的樣品，與各種細胞懸液兼容，也能處理細針穿刺和組織活檢樣本。
單細胞挑選雖不能觀察圖像，卻強調(diào)了整個過程的自動化，它可以同時捕獲96個的細胞，在同一張芯片上完成細胞捕獲、裂解、逆轉(zhuǎn)錄及預(yù)擴增的全過程，整個過程無需任何手動的溶劑混合及樣品轉(zhuǎn)移操作。單細胞挑選利用非均勻電場對細胞施力，并結(jié)合形態(tài)學(xué)的信息，實現(xiàn)單個細胞的捕獲、操控和回收。整個過程無物理接觸或摩擦，保持了細胞活性，這樣獲得的細胞可以繼續(xù)培養(yǎng)或者應(yīng)用于表達譜、測序、拷貝數(shù)變異等分析。
單細胞挑選雖不能觀察圖像，卻強調(diào)了整個過程的自動化，它可以同時捕獲96個的細胞，在同一張芯片上完成細胞捕獲、裂解、逆轉(zhuǎn)錄及預(yù)擴增的全過程，整個過程無需任何手動的溶劑混合及樣品轉(zhuǎn)移操作。