详细介绍
化学结构:
异硫氰酸荧光素酯(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)是一种常用的荧光标记试剂。
异硫氰酸荧光素酯具有良好的荧光特性和标记能力。
结构式:
基础知识概述:
3326-32-7,Fluorescein Isothiocyanate
中文名:异硫氰酸荧光素酯
英文名:Fluorescein Isothiocyanate
分子式:C21H11NO5S
分子量:389.38
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
相关应用:
生物分子标记:FITC的异硫氰酸基团可以与蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团结合,用于标记抗体、凝集素等生物分子。标记后的抗体或蛋白质仍保留其特异性,可用于免疫荧光、流式细胞术、免疫组化等检测。
病原体检测:通过标记抗体,FITC可用于快速鉴定细菌、病毒或寄生虫等病原体。
细胞与组织成像:可用于标记多糖、脂质等,研究细胞吞噬、血管通透性及组织分布。
蛋白质相互作用研究:通过荧光共振能量转移(FRET)技术,FITC可用于研究蛋白质之间的相互作用。
使用说明:
1. 标记反应
1) 取算好体积的新鲜配制的 50 μL FITC 缓慢加入到 1 mL 蛋白样品溶液中,轻轻摇匀混合,然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀,防止蛋白样品变性失活。
2) 将该反应小管置于避光处,在室温条件下轻轻摇晃孵育 8 h,每隔 30 分钟,将反应小管轻轻颠倒几次,以充分混合两种反应物,提高标记效率。
3) 加入 5 M 的 NH4Cl 至终浓度 50 mM,4℃ 终止反应 2 h。
2. 蛋白纯化脱盐
以下方案以使用 Sephadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。
1) 按照生产说明书制备 Sephadex G-25 柱。
2) 将反应混合物装入Sephadex G-25 色谱柱顶部。
3) 当样品运行到顶部树脂表面下方时,立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。
4) 向所需样品中加入更多的PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合物含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
Fluorescein-peg3-(n-boc)-amine
Fluorescein-thiourea-PEG2-azide
6-Fluorescein dT phosphoramidite
5'-(5-Fluorescein) phosphoramidite
N-(Azido-PEG2)-N-Fluorescein-PEG3-acid
Fluorescein 6-isothiocyanate
Fluorescein Potassium Salt
Fluorescein dipropionate
Fluorescein-5-thiosemicarbazide
Fluorescein-thiourea-PEG6-acid
3326-32-7,Fluorescein Isothiocyanate