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技術(shù)文章

實驗室里的寶藏:AF594 Ethyl NHS Ester大揭秘!

閱讀:37          發(fā)布時間:2025-7-9

高熒光亮度:AF594 是一種水溶性的紅熒光染料,熒光亮度高,光穩(wěn)定性好。

pH穩(wěn)定性:在pH 4-10范圍內(nèi)熒光不受影響。

高標(biāo)記效率:通過NHS酯基團(tuán)與生物分子中的伯胺(-NH2)反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

高水溶性:磺化結(jié)構(gòu)使其具有良好的水溶性,減少蛋白質(zhì)聚集。 

基礎(chǔ)知識概述:  

英文名:AF594 Ethyl NHS Ester 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg、10mg 

試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用:

1.蛋白質(zhì)標(biāo)記:

可用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)、肽段等生物分子。

2.核酸標(biāo)記:

可用于標(biāo)記胺修飾的寡核苷酸。

3.多色成像:

適用于多色熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和超分辨成像技術(shù)(如dSTORM、SIM、STED等)。

使用方法:

1.標(biāo)記蛋白質(zhì):

準(zhǔn)備蛋白質(zhì)儲備液(溶液A):

將100 μL反應(yīng)緩沖液(如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氫鈉溶液)與900 μL目標(biāo)蛋白溶液(濃度>2 mg/mL)混合。

蛋白質(zhì)溶液的pH值應(yīng)為8.5±0.5。

準(zhǔn)備染料儲備液(溶液B):

將無水DMSO加入AF594 NHS酯中,制備10 mM儲備溶液。

染料儲備溶液應(yīng)在制備后立即使用,避免長期保存。

進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng):

使用10:1的摩爾比(染料/蛋白質(zhì))作為起始點,將5 μL染料儲備液加入到95 μL蛋白質(zhì)溶液中。

在室溫下孵育30-60分鐘。

純化偶聯(lián)物:

使用Sephadex G-25柱純化染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物。

2.標(biāo)記寡核苷酸:

按照類似步驟進(jìn)行標(biāo)記,調(diào)整反應(yīng)條件以適應(yīng)寡核苷酸。

包裝:

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質(zhì)量控制:95%+

存儲條件:-20°C,避光,避濕

用途:僅供科研實驗使用,不用于診治

注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干

取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。


相關(guān)試劑:

DHPDS disodium salt

5-FAM maleimide

Methyl Orange

Cy7 tyramide

Sulfo-Cyanine7 NHS ester TEA

1,6-Diphenylhexa-1,3,5-triene

Sulfo-Cy5-Mal

Alexa fluor 488 azide ditriethylamine

7-Dimethylaminocoumarin-4-acetic acid

Cy5-DSPE chloride

Calcein Blue

Bromocresol green

BODIPY TR Ceramide

Vari Fluor 680-Streptavidin

Thiazole orange dimer YOYO 1

Sunset Yellow FCF 




供應(yīng)商:陜西新研博美生物科技有限公司

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