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2023-9-22 閱讀(527)
溴化乙錠在電泳中的作用是什么？
在通過瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 片段的過程中，有時(shí)會(huì)將溴化乙錠 (EtBr) 添加到運(yùn)行緩沖液中。 使用它是因?yàn)樵诜肿优c DNA 結(jié)合并用紫外光源照射后，可以看到 DNA 條帶圖案。
溴化乙錠的用途是什么？
溴化乙錠是凝膠中常用的DNA 和 RNA 檢測(cè)染料。 溴化乙錠是一種 DNA 嵌入劑，將自身插入雙螺旋中的堿基對(duì)之間。
溴化乙錠在凝膠電泳中的用途是什么？為什么在使用溴化乙錠時(shí)要始終戴手套？
必須戴手套并注意避免污染實(shí)驗(yàn)室以及做好個(gè)人進(jìn)行防護(hù)。當(dāng)凝膠暴露在紫外線下時(shí)，可以在一條帶中看到低至 0.05 μg 的 DNA。 EtBr-核酸復(fù)合物吸收約 260 或 300 nm 的紫外輻射。
溴化乙錠如何使 DNA 可見？
溴化乙錠也用于瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 片段。 它被添加到運(yùn)行緩沖液中并通過插入 DNA 堿基對(duì)之間進(jìn)行結(jié)合。 當(dāng)使用紫外光照射瓊脂糖凝膠時(shí)，DNA 條帶變得可見。
EtBr 如何與 RNA 結(jié)合？
溴化乙錠 結(jié)合在 DNA 中堆積的堿基之間。作為一個(gè)大的平面分子，它通過在單個(gè) DNA（或 RNA）鏈的堆疊堿基之間以及互補(bǔ)鏈的堿基之間形成緊密的范德華接觸而結(jié)合。
溴化乙錠和考馬斯亮藍(lán)在凝膠電泳中起什么作用？
在凝膠電泳過程中對(duì)核酸進(jìn)行染色有幾種選擇:溴化乙錠 (EtBr) 是常用的 DNA 染料。此外，它在藍(lán)光下發(fā)出熒光，可防止使用紫外線時(shí)發(fā)生的 DNA 損傷。
使用溴化乙錠 EtBr 進(jìn)行染色有哪兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)？
溴化乙錠在水溶液中的熒光明顯低于螯合染料。溴化乙錠是一種敏感、易染色的 DNA。它產(chǎn)生低背景和 1-5ng/band 的檢測(cè)限。
EtBr 在瓊脂糖凝膠中的作用是什么？
EtBr 用作著色劑，為 DNA 提供顏色。 EtBr 在瓊脂糖凝膠電泳中用作分離劑。EtBr 嵌入 DNA 堿基對(duì)之間并在紫外光下發(fā)出熒光。通過使用標(biāo)準(zhǔn)的橙色濾光片，可以看到橙色的 DNA。
為什么 EtBr 會(huì)與 DNA 發(fā)生熒光？
溴化乙錠與 DNA 結(jié)合后發(fā)出強(qiáng)烈熒光的原因是堿基對(duì)之間存在疏水環(huán)境。通過進(jìn)入該環(huán)境并遠(yuǎn)離溶劑，EtBr 陽離子被迫脫落任何與水相關(guān)的分子。
