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參考價	面議

細胞培養(yǎng)

動物細胞培養(yǎng)

微生物細胞培養(yǎng)

貝博生物

產品概述 product description (Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的原分泌到小腸后，小腸內的腸肽酶會活化該酶原，形成。經常用于動物組織的培養(yǎng)細胞消化或者一些組織的消化，但對細胞有的潛在損害，尤其是在37℃環(huán)境下危害較大。貝博無酶細胞消化液(Non-enzy Cell Detach Solution)不含等蛋白消化酶類，但能有效地使貼壁細胞與培養(yǎng)瓶皿表面脫離而達到分離細胞目的。其特點是：1、作用溫和；2、對細胞的損傷和破壞極小，不影響細胞生物學特性，是腫瘤細胞的細胞脫壁方法；3、可以在血清存在的情況下進行消化。消化后的細胞可進行傳代培養(yǎng)，亦可用于提取核蛋白和胞漿蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等實驗，通常室溫下10min左右就可以消......

詳細介紹

保存溫度

-20℃保存

注意事項

1、長期存放請分裝后-20℃保存。
2、避免反復凍融。
3、凍存后溶解時注意重新混勻。

有效期

一年

儀器準備

1. PBS、培養(yǎng)液
2. 顯微鏡
3. 離心機

使用注意事項

1) 盡量減少反復凍融的次數，以免失效。
2) 在使用細胞消化液的過程中，要特別注意避免消化液被細菌污染。
3) 細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 貼壁細胞的消化：
（1）吸除培養(yǎng)液，用無菌PBS、培養(yǎng)液洗滌細胞1次；
（2）加入少量無酶細胞消化液，略蓋過細胞即可。（一般按細胞的有效體積的10倍添加）
（3）室溫放置10min （如置于37℃脫壁反應會加速），直至細胞脫壁。（不同細胞消化時間有差異）。亦可用顯微鏡觀察，如果細胞明顯收縮并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍頭吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來，吸除消化液。
（4）加入細胞培養(yǎng)液或5倍體積的PBS緩沖液終止反應。如果發(fā)現消化不足，則再加入無酶細胞消化液重新消化。
（5） 1000-2000g離心3-5min，沉淀細胞，棄上清，盡量吸除無酶細胞消化液，加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。

2. 組織的消化：
（1）用無菌PBS、培養(yǎng)液洗滌組織1次，用無菌的刮勺或茶匙將剪碎的組織碎片轉移至合適容器。
（2）按組織有效體積的5-10倍，加入無酶細胞消化液。
（3）置于37℃作用4-48小時，無需振蕩，不同的細胞消化時間有所不同。對于較難分解的腫瘤細胞，可作用5天或更長時間，但應重新用消化液懸浮。
（4）吹打組織碎片數次，釋放松散的細胞，輕輕晃動培養(yǎng)瓶或皿，倒置顯微鏡下檢查分離情況。當細胞量少和/或在組織碎片中仍可見細胞時，需要繼續(xù)消化。
（5） 1000-2000g離心3-5min，沉淀細胞，棄上清，盡量吸除無酶細胞消化液，加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。