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2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

一年

分光光度计

植物

分光光度计

1.离心机
2.水浴锅或恒温箱
3.分光光度计

1.蒸馏水
2.氢氧化钠溶液

1.离心管
2.吸头

1. 试剂盒里的低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降；
2. 待测样品如不能及时测定，请置于2-8℃保存，3天内稳定；
3. 如果样品还原糖浓度过高，用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数；
4. 总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用，x0.9 是为了从测定出的总糖水解成单糖中，扣除水解时所消耗的水量。

1. 还原糖的提取：
①称取植物样品0.5－3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2－3次，洗出液也转移至该容器。
②50℃水浴30min，并不时搅拌，以便还原糖浸出。
③将沉淀和浸出液转移至50ml离心管，4000g离心5min。
④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸馏水，混匀，再次4000g离心5min。
⑤留取上清液，将2次获得的上清液合并，用蒸馏水定容至100ml(提取液)，混匀，作为还原糖待测液。

2. 总糖的水解和提?。?br>①称取植物样品0.5－3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2－3次，洗出液也转移至该容器。
②向容器中加入10ml 6M盐酸溶液，搅拌均匀，煮沸30min，并不时搅拌。
③取2滴滴加于载玻片上，滴加1滴显色液，检查水解是否，如已经水解，则不显示蓝色。
④水解完毕后，冷却至室温，加入6M氢氧化钠溶液，使溶液pH至7.4，用蒸馏水定容至100ml，混匀，4000g离心5min或过滤。
⑤取上清或滤液10ml，用蒸馏水定容至100ml，成稀释1000倍的总糖水解液(提取液)，取1ml总糖水解液，测定其还原糖的含量。

3. 制作葡萄糖标准曲线：
取干净离心管或试管，按下表进行操作，以0号调零，检测540nm处吸光度，以吸光度值为纵坐标，各标准浓度(mg/ml)为横坐标作图得标准曲线。
4、还原糖测定：
取制备好的还原糖提取液或者总糖水解液1ml，分别加入DNS检测液2ml，其余操作同标准曲线的操作，540nm处测定各管的吸光度。

5. 计算：
还原糖的百分含量：还原糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100

总糖的百分含量：总糖含量（%）=（C x VT）/(m x Vs) x 100x 10 x 0.9

式中：C=从标准曲线查的糖量（mg）
VT=提取液的体积（ml）
m=植物样品的质量（mg）
Vs=测定时用的样品体积（ml）