使用方法
1. 将适量待提取种子样本剥皮,用PBS或纯水洗涤3次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入500ul蛋白提取液A充分混匀。移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-60分钟。
5. 在4℃,15000g离心20分钟。
6. 收集上清,弃沉淀。
7. 取5ml离心管,加入500ul离心上清,再加入2ml试剂B,500ul试剂C,1.5ml试剂D,涡旋20秒充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃,11000g条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃,收集中下层含蛋白层。
11. 在4℃,15000g以上条件下离心20分钟。
12. 弃上清,收集沉淀。
13. 用50-200ul试剂E充分溶解蛋白沉淀。
14. 在4℃,12000g条件下离心20分钟。
15. 收集上清用于下游实验。