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目录:上海贝博生物科技有限公司>>蛋白质生物学>>蛋白提取和裂解>> 植物种子蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

植物种子蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
  • 植物种子蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
  • 品牌 贝博生物
  • 型号
  • 厂商性质 生产商
  • 所在地
属性

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更新时间:2025-07-24 21:44:17浏览次数:177评价

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产品概述 product description 贝博TM BBproExtraTM植物种子蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种高淀粉含量的植物种子样品中提取可溶性蛋白。如水稻、荞麦、玉米、小麦等。提取过程简单方便。 本试剂盒提取的蛋白样本不含有高浓度的盐成分,可直接用于等电聚焦、双向电泳,如下游实验需要直接用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验,请使用贝博其他货号的试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存??鞘褂煤?20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
双向电泳
适用样本
植物种子
产品应用
双向电泳
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
?
使用方法
1. 将适量待提取种子样本剥皮,用PBS或纯水洗涤3次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入500ul蛋白提取液A充分混匀。移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-60分钟。
5. 在4℃,15000g离心20分钟。
6. 收集上清,弃沉淀。
7. 取5ml离心管,加入500ul离心上清,再加入2ml试剂B,500ul试剂C,1.5ml试剂D,涡旋20秒充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃,11000g条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃,收集中下层含蛋白层。
11. 在4℃,15000g以上条件下离心20分钟。
12. 弃上清,收集沉淀。
13. 用50-200ul试剂E充分溶解蛋白沉淀。
14. 在4℃,12000g条件下离心20分钟。
15. 收集上清用于下游实验。
常见问题分析
1.蛋白浓度低?
部分植物种子蛋白丰度极低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂E中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。

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