使用方法
1、 试剂准备:
每500ul膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2、 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg植物组织样本用刀尽可能剪碎。
3、 加入500ul冷的提取液A,用组织匀浆机/匀浆器充分匀浆。
4、 匀浆后移入一个干净离心管中在2-8℃振荡1-2小时。
5、 将提取液在2-8℃条件下12000g离心5分钟,取上清。
6、 在上清中加入5ul提取液B,充分混匀。
7、 在37℃水浴10分钟。
8、 在37℃, 1000g离心3分钟。
9、 此时液体分为2层,小心移除上层部分,吸取下层管底部大约50ul液体。
10、 用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下层溶液,即得膜蛋白样品。
11、 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。