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增强型ECL化学发光检测试剂盒

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品牌 贝博生物
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更新时间：2025-07-08 08:28:48浏览次数：296评价

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产品分类品牌分类

蛋白质生物学

蛋白表达

蛋白提取和裂解

细胞器分离

蛋白纯化

蛋白质浓缩和缓冲液置换

蛋白定量

蛋白凝胶电泳

免疫组织化学

全部产品列表

贝博生物

产品简介

产品概述 product description 贝博® BBproExtra® 增强型ECL试剂盒采用高品质进口原料，经大量样本实验验证优化配方。稳定性高，检测方便，可检测pg级的抗原。

详细介绍

保存温度

2-8℃

注意事项

1.长期不用-20℃储存。
2.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

仪器准备

1.移液器
2.冰箱
3.冰盒

试剂准备

纯水

耗材准备

1.离心管
2.吸头
3.一次性手套

使用注意事项

1.ECL工作液配制过程中吸取试剂A和试剂B时务必跟换吸头，工作液新鲜配制后立即使用，放置过久会影响灵敏度。
2.根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
3.曝光时间过长会使背景加深，曝光不足会导致条带模糊。
4.如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL发光和曝光。
5.必须使用高质量保鲜膜。

使用方法

1. 使用合适的方法进行 Western，直至用PBST洗涤二抗。
2. 配制新鲜ECL工作液：试剂A和试剂B按1:1混合均匀后即为ECL工作液。
3. 印迹膜蛋白面朝上，用ECL工作液均匀滴加至印迹膜使其覆盖。ECL工作液使用量大约为0.125ml/cm2膜或根据个人实验习惯使用。
4. 用平头镊夹住印迹膜，垂直置于吸水纸以吸去自然流下的多余工作液，注意不能让膜干掉。
5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间，尽量赶尽气泡。
6. 将印迹膜蛋白面朝上，放于X光胶片暗盒内。（如果用显像仪器直接置于仪器中拍照即可）
7. 在暗室内放入X光片，曝光，显影。如果在暗室中可肉眼看到比较亮的条带，建议曝光1分钟-3分钟；如果肉眼看到的带比较淡，建议曝光3-10分钟；如果很淡或基本看不到带，建议曝光10分钟-30分钟。

常见问题分析

1.为什么会发生光淬灭？
抗原浓度太高，局部过多的HRP会快速消耗底物，导致光信号过强，条带呈灼烧样?？山档涂乖涎?。
操作时间过长，膜逐渐干掉。避免膜干掉。
不良的实验习惯导致设备或试剂污染。例如铁锈和不慎沾染的显影液、定影液，会造成光淬灭，甚至直接导致无荧光。

参考文献

1.Ouyang Chen, Zhouheng Ye et al.
Methane attenuates myocardial ischemia injury in rats through anti-oxidative, anti-apoptotic and anti-inflammatory actions
Free Radical Biology and Medicine 2016 （IF=5.784）

2.Guoming Zhang, Song Gao et al.
Pharmacological Postconditioning with Lactic Acid and Hydrogen Rich Saline Alleviates Myocardial Reperfusion Injury in Rats
Scientific reports 2015 （IF=5.228）

3.Hao Liua, Anmin Chena et al.
A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 （IF=6.508）