详细介绍
PCR反应体系与反应条件:
小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片标准的PCR反应体系
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品名称 | 小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片 |
规格 | 50T |
价格 | 电询 |
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技术概论:
小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
产品特点:
小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。
要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一区域设计引物。
现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为15-30碱基,扩增片段长度为100-600碱基对。
让我们先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%-60%。而且四种碱基的分布随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P1引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。
同时引物之间也不能有互补性,一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。
引物确定以后,可以对引物进行必要的修饰,例如可以在引物的5′端加酶切位点序列;标记生物素、荧光素、等,这对扩增的特异性影响不大。但3′端不能进行任何修饰,因为引物的延伸是从3′端开始的。这里还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第3位,因为密码子第3位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。
阪崎肠杆菌rpsU-dnaG 基因荧光PCR检测试剂盒间序列(探针法)综上所述我们可以归纳十条PCR引物的设计原则:
1、小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。
2、 产物不能形成二级结构。
3、引物长度一般在15~30碱基之间。
4、G+C含量在40%~60%之间。
5、碱基要随机分布。
6、引物自身不能有连续4个碱基的互补。
7、引物之间不能有连续4个碱基的互补。
8、引物5′端可以修饰。
9、引物3′端不可修饰。
10、引物3′端要避开密码子的第3位。
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)(5×105)RDFs,大鼠真皮成纤维细胞Rattus
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2
NGFROthersMouse小鼠NGFR/P75人细胞裂解液(阳性对照)
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞PK15-EGFP-puro(leiviralconsuctstablesain)porcinekidneyepithelialcellsEMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/mlpuromycin
IL13ProteinHuman重组人IL13/ALRH蛋白(Fc标签)
胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
NUMB膜相关蛋白Numb抗体规格:0.2ml
Phospho-Numb(Ser276)磷酸化膜相关蛋白Numb抗体规格:0.1ml
Nurr1核受体相关因子-1抗体规格:0.1ml
OAS1寡腺苷酸合成酶-1规格:0.1ml
OAT-1/SLC22A6阴离子转运蛋白-1抗体规格:0.1ml
小反刍兽RT-PCR检测试剂盒图片D-(−)-QuinicacidD-(-)-奎宁酸 规格:HPLC≥98%,标准品
Capsaicin辣椒碱,辣椒素(天然提取标准品) 规格:HPLC≥98%,标准品
Capsaicin辣椒碱,辣椒素(天然提取) 规格:HPLC≥98%,标准品
Capsaicin辣椒碱,辣椒素(合成) 规格:HPLC≥98%,标准品
RebaudiosideC莱苞迪甙C 规格:HPLC≥98%,标准品
RebaudiosideD莱苞迪甙D 规格:HPLC≥98%,标准品
Geraniin老鹳草素 规格:HPLC≥98%,标准品
Tyrosol酪醇 规格:HPLC≥98%,标准品
Triptophenolide雷酚内酯 规格:HPLC≥98%,标准品
Celastrol雷公藤红素 规格:HPLC≥98%,标准品
Triptolide雷公藤甲素 规格:HPLC≥98%,标准品
Triptonide雷公藤内酯酮 规格:HPLC≥98%,标准品
Acteoside类叶升麻苷,毛蕊花糖苷 规格:HPLC≥98%,标准品
(-)-LicarinB利卡灵-B 规格:HPLC≥98%,标准品
Reserpine利血平 规格:HPLC≥98%,标准品