详细介绍
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
中文名称 | 埃立克体属通用PCR检测试剂盒 |
英文名称 | Ehrlichiae spp.PCR |
产品规格 | 50T |
保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
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实验过程:
一、试剂准备 | 二、操作步骤 |
1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 |
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human SFPQ ELISA Kit跨膜蛋白1ELISA试剂盒 TMEM1免费代测试剂
Human CLDN4 ELISA Kit跨膜蛋白2ELISA试剂盒 TMEM2免费代测试剂
Human SFRP5 ELISA Kit跨膜蛋白2样蛋白ELISA试剂盒 TMEM2L免费代测试剂
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Human SFRP2 ELISA Kit跨膜结构域4亚家族成员11ELISA试剂盒 MS4A11免费代测试剂
Human SFRP1 ELISA Kit跨膜丝氨suan4ELISA试剂盒 TMPRSS4免费代测试剂
Human CHGB/SCG1 ELISA kit跨膜丝氨suan6ELISA试剂盒 TMPRSS6免费代测试剂
Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit快肌肌钙蛋白CELISA试剂盒 NC2免费代测试剂
Human chlamydia pneumoniae,Cpn ELISA Kit喹啉suan磷suan核糖基转移酶ELISA试剂盒 QPRT免费代测试剂
Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-IgM ELISA Kit蝰蛇毒素ELISA试剂盒 Viperin免费代测试剂
Human Cpn-IgA ELISA Kit醌型二氢蝶啶还原酶ELISA试剂盒 QDPR免费代测试剂
Human Chlamydia pneumoniae(Cpn)aibody(IgG)ELISA Kit莱姆IgGELISA试剂盒 Lyme-IgG免费代测试剂
埃立克体属通用PCR检测试剂盒总一氧化氮合成酶(NOS)测试盒/比色法25管/24样
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总糖含量测试盒/微量法100管/96样
总糖含量测试盒/分光光度法50管/48样
总糖比色法检测试剂盒糖代谢系列50管/48样可见分光光度法
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。