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小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:304

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 外周血
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详细介绍

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产品属性:

产品名称

规格

组织来源

小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)

5×105cells/T25细胞培养瓶

外周血

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。

5.方法简介:

实验室分离的采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  半贴半悬浮

细胞形态  圆形,树突状

传代特性  属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大??;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

磷化脊髓小脑失调症蛋白1抗体 环指蛋白128封闭多肽 人周期依赖性激2(CDK-2)ELISA试剂盒

白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 信号转导和转录激活因子2封闭多肽 人周期依赖性激1(CDK-1) 试剂盒 ELISA

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 长波长敏感的视蛋白封闭多肽 人磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)ELISA检测试剂盒

THUMPD1蛋白抗体 G蛋白偶联受体γ3封闭多肽 人乳脱氢(LDH) ELISA Kit

磷化细胞转录因子ELK1抗体 磷化G蛋白偶联受体激相互作用蛋白1 人解整合样金属9(ADAM9)ELISA试剂盒

细胞因子受体样因子3抗体 7号染色体开放阅读框44封闭多肽 人β位淀粉样前体蛋白裂解2(BACE2)试剂盒 ELISA

同源三聚体锌指蛋白ZHX3抗体 胞浆动力蛋白轻链2封闭多肽 人核苷磷化1(UPP1)ELISA检测试剂盒

FAM122C蛋白抗体 MICAL3蛋白封闭多肽 人乙醇脱氢(ADH)ELISA Kit

磷化胰岛受体底物2抗体 神经营养因子HNT封闭多肽 人乙醛脱氢(ALDH)ELISA试剂盒

锌指蛋白ZGPAT抗体 DNAJB7蛋白封闭多肽 人Rho家族GTP1(RND1)试剂盒 ELISA

细胞生长调节蛋白CGREF1抗体 组织相容性复合物1A1封闭多肽 人受体TNFRSF结合丝氨苏氨激2(RIPK2)ELISA检测试剂盒

磷化B-Raf抗体 微粒体S转移2封闭多肽 人磷脂爬行1(PLSCR1)ELISA Kit

胎盘叶受体蛋白2抗体 重组人FGFR4蛋白 人3-羟基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA试剂盒

溶血磷脂受体蛋白1/EDG2抗体 锌指蛋白378封闭多肽 人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员12(EAR12)试剂盒 ELISA

英文名称: CYP26A1 嗜性粒细胞阳离子蛋白封闭多肽 人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员3(EAR3)ELISA检测试剂盒

促胃泌释放肽抗体 β淀粉样肽1-40(突变型)多肽 人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员2(EAR2)ELISA Kit

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian FAM188B蛋白封闭多肽 人二氢嘧啶样3(DPYSL3)ELISA试剂盒

ATP依赖性解旋ATRX抗体 硫软骨N-乙酰氨半乳糖胺基转移1封闭多肽 人色氨酰tRNA合成(WARS)试剂盒 ELISA
小鼠外周血树突状细胞(成熟DC细胞)大鼠食管成纤维细胞英文名称:大鼠食管成纤维细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠胃黏膜上皮细胞英文名称:大鼠胃黏膜上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠胃平滑肌细胞英文名称:大鼠胃平滑肌细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠胃成纤维细胞英文名称:大鼠胃成纤维细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠小肠黏膜上皮细胞英文名称:大鼠小肠黏膜上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠小肠平滑肌细胞英文名称:大鼠小肠平滑肌细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

大鼠小肠隐窝上皮细胞英文名称:大鼠小肠隐窝上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告


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