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4.细胞简介：

分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的；树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 )，伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。

5.方法简介：

实验室分离的采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

实验室分离的经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基  含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    每2-3天换液一次

生长特性  半贴半悬浮

细胞形态  圆形，树突状

传代特性  属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相：空气，95%；CO2，5%

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告：

磷化17β羟基类固醇脱氢13抗体　甲基化样蛋白19封闭多肽　人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒

顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体　干扰β封闭多肽　人多功能蛋白聚糖(VS)试剂盒ELISA

转录因子SOX-11蛋白抗体　垂体瘤转化蛋白2封闭多肽　人B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA检测试剂盒

白介2抗体　核孔蛋白Nup37封闭多肽　人ADAM金属肽含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa试剂盒

β3肾上腺能受体抗体　紧密连接蛋白1封闭多肽　人类似RIKENcDNA4933429F08基因试剂盒elisa

11号染色体开放阅读框16抗体　微管蛋白封闭多肽　人孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)检测试剂盒elisa

膜粘连蛋白13抗体　封闭多肽　人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)ELISA试剂盒

第10号染色体开放阅读框27抗体　RNA结合蛋白34封闭多肽　人丝氨抑制因子肽抑制因子进化枝3G(Serpina3g)试剂盒ELISA

英文名称: MUC2　氯离子通道调节蛋白1A封闭多肽　人类似RIKENcDNAA630077B13基因ELISA检测试剂盒

金属离子转运体1抗体　真核翻译起始因子4G封闭多肽　人类似RIKENcDNA3110050K21基因elisa试剂盒

双皮质抗体　磷化Ephrin B封闭多肽　人类似RIKENcDNA2610307008基因试剂盒elisa

自噬微管相关蛋白轻链β3抗体　磷化非受体酪氨激c-Abl封闭多肽　人类似RIKENcDNA2010109K09基因检测试剂盒elisa

阳离子转运蛋白2抗体　磷化磷脂酰肌醇激调节亚单位gamma封闭多肽　人ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒

细胞色C氧化蛋白6B2抗体　锌指蛋白589封闭多肽　人假定蛋白LOC677340试剂盒ELISA

英文名称: Cytokeratin 19　补体4结合蛋白封闭多肽　人假定蛋白LOC433328ELISA检测试剂盒

CRB2蛋白抗体　ZNF792/锌指蛋白792封闭多肽　人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)elisa试剂盒

钙/钙调依赖蛋白激2b/2γ抗体　腱调蛋白/软骨调节样1蛋白封闭多肽　人干扰活化基因205(Ifi205)试剂盒elisa

妊娠特异性糖蛋白4抗体　活化半胱胺蛋白-3封闭多肽　人组织相容性2-K1-K区(H2-K1)检测试剂盒elisa
人骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)panc02小鼠胰腺癌细胞英文名称：panc021×106DMEM+5%FBS+1%P/S（STR鼠源鉴定）报告

panc02+LUC小鼠胰腺癌细胞荧光标记英文名称：panc02+LUC1×106DMEM+5%FBS+1%P/S（panc02鼠源鉴定）报告

PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆转录病毒包装细胞系英文名称：PT-671×106DMEM+10%FBS+1%P/S（STR鼠源鉴定）报告

RAG小鼠肾腺癌细胞英文名称：RAG1×106MEM+10%FBS+1%P/S （STR鼠源鉴定）报告

RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞英文名称：RAW 264.71×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化细胞刮代替，易分化传代时密度要大（STR鼠源鉴定）报告

RAW 264.7+GFP小鼠单核巨噬细胞白血病细胞+GFP英文名称：RAW 264.7+GFP1×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化细胞刮代替，易分化传代时密度要大（提供RAW264.7鉴定）报告

Renca 小鼠肾癌细胞英文名称：Renca 1×1061640+10%FBS+1%P/S（STR鼠源鉴定）报告