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大鼠胚肺成纤维细胞

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:251

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 胚胎;肺组织
大鼠胚肺成纤维细胞的相关产品:大鼠肝窦内皮细胞原代细胞5×105大鼠肝Kupffer细胞原代细胞5×105大鼠结肠神经元细胞原代细胞5×105大鼠肝间质细胞原代细胞5×105大鼠肝成纤维细胞原代细胞5×105

详细介绍

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自胚肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞在合成和分泌细胞因子、维持血管内外和凝血和纤溶的的动态平衡中起重要作用。

5.方法简介:

实验室分离的采用胰dan白 - 胶原混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  成纤维细胞样

传代特性  可传5代左右;3代以内状态佳

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠胚肺成纤维细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

胚胎;肺组织

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大?。?/span>
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

磷化原癌基因蛋白18 整合样金属与13型封闭多肽 

热休克转录因子2抗体 肽基脯氨酰顺反异构FKBP11封闭多肽 

α1微球蛋白单克隆抗体 离子通道蛋白Kv3.3封闭多肽 

磷化KLF5抗体 B细胞活化因子受体(CD268)封闭多肽 

FBXW8蛋白抗体 胎盘生长因子封闭多肽 

细胞色P450 19抗体 CD350封闭多肽 

HHIP蛋白抗体 重组乙肝病毒核心抗原 

C-反应蛋白单克隆抗体 核孔复合蛋白Nup53封闭多肽 

白细胞介27β抗体 短链L-3羟烷基脱氢封闭多肽 

甲基化样蛋白21D抗体 重组肿瘤抑制基因P53/野生型P53蛋白 

乳腺癌易感基因2抗体 痉挛性截瘫相关蛋白20封闭多肽 

DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体 DTWD1蛋白封闭多肽 

羟基类固醇脱氢3α/3α-羟类固醇脱氢Ⅰ抗体 染色质修饰蛋白CHMP7封闭多肽 

分泌型免疫球蛋白A抗体 8号染色体开放阅读框30a封闭多肽 

英文名称: Valine 磷化原癌基因c-Raf封闭多肽 

CARD9抗体 胰岛β细胞生长因子封闭多肽 

Cy7标记小鼠抗人CD45单克隆抗体 磷化一氧化氮合成3(内皮型)封闭多肽 

α1微球蛋白单克隆抗体 抑制βB/Inhibin β B封闭多肽  
大鼠胚肺成纤维细胞原代T淋巴细胞培养体系英文名称:原代T淋巴细胞培养体系500mL

原代基质细胞培养体系英文名称:原代基质细胞培养体系100mL

原代基质细胞培养体系英文名称:原代基质细胞培养体系500mL

原代卵巢颗粒细胞培养体系英文名称:原代卵巢颗粒细胞培养体系100mL

原代卵巢颗粒细胞培养体系英文名称:原代卵巢颗粒细胞培养体系500mL

原代肥大细胞培养体系英文名称:原代肥大细胞培养体系100mL

原代肥大细胞培养体系英文名称:原代肥大细胞培养体系500mL
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 


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