详细介绍
产品属性:
产品名称:弧菌通用PCR检测试剂盒
英文名称:Vibrio spp.PCR
规格:50T
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
公司产品仅用于科研运输:低温、避光,快递免费送货上门。
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PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
血小板亲和蛋白1ELISA试剂盒 PKP1Human CTX-2 Elisa Kit
血小板膜糖蛋白ⅣELISA试剂盒 GP4Human Bone Morphogenetic Protein 6, BMP-6 Elisa Kit
血小板膜糖蛋白Ⅱb/ⅢaELISA试剂盒 GPⅡbⅢaHuman fatty acid-binding protein, FABP Elisa Kit
血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽ELISA试剂盒 GP1BaHuman ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1 Elisa Kit
血小板碱性蛋白ELISA试剂盒 PBP/CXCL7Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein, HRGP Elisa Kit
血小板激活因子乙酰水解酶Ⅰb3ELISA试剂盒 PAFAH1B3Human Glucose transporter 1, GLUT1 Elisa Kit
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶9ELISA试剂盒 ADAMTS9Human low density lipoprotein, LDL Elisa Kit
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5ELISA试剂盒 ADAMTS5Human Arachidonic Acid, AA Elisa Kit
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4ELISA试剂盒 ADAMTS4Human bone sialoprotein, BSP Elisa Kit
血纤肽/纤维蛋白肽BELISA试剂盒 FPBHuman bone alkaline phosphatase, BALP Elisa Kit
血纤肽/纤维蛋白肽AELISA试剂盒 FPAHuman Cyclophosphamide, CTX Elisa Kit
血吸虫抗体ELISA试剂盒 IgMHuman 1, 3-Disphosphoglycerate, 1, 3-DPG Elisa Kit
血吸虫ELISA试剂盒 SHHuman 1, 5-anhydroglucitol, 1, 5-AG Elisa Kit
血栓烷受体ELISA试剂盒 TPHuman Beta-Hydroxybutyric Acid, β-OHB Elisa Kit
弧菌通用PCR检测试剂盒蛋白激酶R(PKR)重组蛋白Recombina Protein Kinase R (PKR)
红素氧合酶2(HO2)重组蛋白Recombina Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)
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血管紧张素转化酶2(ACE2)重组蛋白Recombina Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白Rec?