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人軟骨細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 軟骨組織
人軟骨細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:豬骨骼肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105豬皮膚成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105豬脂肪干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105豬B淋巴細(xì)胞原代細(xì)胞1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人軟骨細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

軟骨組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強(qiáng),這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞,并形成軟骨基質(zhì),細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個(gè)分布,體積較小,呈橢圓形,長(zhǎng)軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 中性dan白聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Cappuccino蛋白抗體 腎母細(xì)胞瘤X蛋白封閉多肽 

ADP核糖水解PARG抗體 檢查點(diǎn)蛋白HUS1B封閉多肽 

富含半胱氨運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體 鋅指蛋白90封閉多肽 

驅(qū)動(dòng)蛋白輕鏈3抗體 Artemin封閉多肽 

5抗體 鋅指蛋白117封閉多肽 

磷二酯6β抗體 CD6封閉多肽 

鳥氨氨基轉(zhuǎn)移抗體 FC段IgE受體α多肽/Fc ε RIα封閉多肽 

間隙連接蛋白31抗體 胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6封閉多肽 

NK細(xì)胞受體2D(CD314)抗體 FAM129B蛋白封閉多肽 

賴氨羥化2抗體 多聚腺苷因子Clp1蛋白封閉多肽 

細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白2抗體 因子蛋白 

神經(jīng)性舞蹈病蛋白抗體 腫瘤壞死因子C/淋巴毒β封閉多肽 

胰島受體α抗體 鋅指蛋白18封閉多肽 

單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 磷化微管相關(guān)蛋白2封閉多肽 

過量位點(diǎn)蛋白5抗體 絲裂原活化蛋白激組織蛋白1封閉多肽 

COPT2抗體 緊密連接蛋白2封閉多肽 

Cy3標(biāo)記小鼠抗人CD22單克隆抗體 蛋白質(zhì)精氨亞型1封閉多肽 

干擾-gamma受體1抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框64/C19orf64封閉多肽 
人軟骨細(xì)胞EL-4-B5細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4EL-4-B5細(xì)胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持EL-4-B5細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含EL-4-B5細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于EL-4-B5細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM無糖(不含L-)500mL-

小鼠牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠牙齦上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠牙齦上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠牙齦上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM/F12(含HEPES、雙抗)500mL-

M-22細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4M-22細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持M-22細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含M-22細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于M-22細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H2170細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H2170細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H2170細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H2170細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H2170細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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