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大鼠视网膜色素上皮细胞

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:300

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 视网膜组织
大鼠视网膜色素上皮细胞的相关产品:人睾丸支持细胞5×10?Cells/T25培养瓶E.G7-OVA (小鼠T淋巴瘤细胞)1×10?cells/T25培养瓶MDA-MB-231 (人乳腺癌细胞) (DMEM) (STR鉴定正确)1×10?cells/T25培养瓶人主动脉内皮细胞5×10?Cells/T25培养瓶Hi-five (BTI-TN-5B1-4) (昆虫细胞)1×10?cells/T25培养

详细介绍

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产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠视网膜色素上皮细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

视网膜组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力强。视网膜色素上皮(RPE)位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道;主要是由单层色素上皮细胞所构成,排列十分规则。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形,细胞分为三部分,即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力,细胞死亡后不被替换,而是邻近的细胞向侧面滑动,以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。

5.方法简介:

实验室分离的采用胰dan白-胶原混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  上皮细胞样

传代特性  可传1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

HLA-DR抗体 内脏异位相关蛋白/锌指蛋白203封闭多肽 

磷化细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体 GTPIMAP家族成员1封闭多肽 

酪氨蛋白激B3抗体 叉头蛋白F2封闭多肽 

γ-谷氨酰转肽2重链抗体 磷化促凋亡Bik蛋白封闭多肽 

锌指蛋白321B抗体 精子成熟相关蛋白BOULE封闭多肽 

组织相容性复合体蛋白2反式激活因子抗体 胞浆苹果1封闭多肽 

整合β6/Integrin β6抗体 染色体相关蛋白2封闭多肽 

线粒体铁转运蛋白2抗体 丝氨/苏氨蛋白激Nek11封闭多肽 

成纤维细胞生长因子17抗体 FITM2蛋白封闭多肽 

DZANK1蛋白抗体 Kelch样蛋白17封闭多肽 

G蛋白偶联受体激6抗体 波形蛋白封闭多肽 

BEND4蛋白抗体 4号染色体开放阅读框3封闭多肽 

锌指脂蛋白-1b抗体 COPS9蛋白封闭多肽 

羟磺基转移2抗体 异质核糖核蛋白H封闭多肽 

血小板反应蛋白2/敏感蛋白2抗体 KIAA0701蛋白封闭多肽 

磷化蛋白酪氨激JAK-3抗体 磷化γ氨基丁γ2受体封闭多肽 

自主生长因子GFI1抗体 视网膜色上皮细胞特异性蛋白65封闭多肽 

嗅觉受体5L2抗体 神经突触13封闭多肽 
大鼠视网膜色素上皮细胞人卵巢成纤维细胞5×10?Cells/T25培养瓶

人脐带血造血干细胞5×10?Cells/T25培养瓶

人子宫平滑肌细胞5×10?Cells/T25培养瓶

小鼠前列腺上皮细胞5×10?Cells/T25培养瓶

大鼠牙龈成纤维细胞5×10?Cells/T25培养瓶

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HTR-8/Svneo (人绒毛膜滋养层细胞) RPMI-1640+5% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶


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