详细介绍
规格参数:
产品名称 | 小鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞) |
组织来源 | 骨髓 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
4.细胞简介:
分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的;树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。
5.方法简介:
实验室分离的采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
实验室分离的经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 半贴半悬浮
细胞形态 圆形、梭形、多角形,形态多样
传代特性 属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%胰dan白
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
收到如何处理:
1、首先,观察培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬?。⑾赴翁?、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
SHISA5蛋白抗体 9号染色体开放阅读框43封闭多肽
CD24抗体 细胞周期调控相关蛋白1封闭多肽
三核苷重复蛋白6B抗体 细胞表面受体PILRβ封闭多肽
囊泡相关膜蛋白4抗体 异质性核糖核蛋白M封闭多肽
肝表达抗菌肽2抗体 亲环J封闭多肽
1号染色体开放阅读框100抗体 半胱胺蛋白-13封闭多肽
磷化细胞分裂周期蛋白16抗体 跨膜蛋白TMED4封闭多肽
磷化信号转导和转录激活因子5a抗体 Jun激活区域-连接蛋白1封闭多肽
tRNA异亮氨连接抗体 维生D3受体封闭多肽
CD7抗体 磷化细胞分裂周期蛋白25B封闭多肽
肥大细胞表达膜蛋白1抗体 三磷腺苷结合盒转运体3封闭多肽
英文名称: Gibberellins PE标记鸡卵白蛋白
大脑蛋白2抗体 载脂蛋白E封闭多肽
甲硫氨转运RNA合成2抗体 褪黑受体1B封闭多肽
GRAM结构域蛋白2抗体 醛糖还原封闭多肽
英文名称: Cytokeratin 15 磷化蛋白激C亚性D型封闭多肽
巨噬细胞炎症蛋白-1γ抗体 FAM19A1蛋白封闭多肽
甲基化样蛋白4抗体 FAM18B蛋白封闭多肽
小鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)大鼠肝外胆管上皮细胞培养基100mL大鼠肝外胆管上皮细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持大鼠肝外胆管上皮细胞佳的生长状态。本产品中已包含大鼠肝外胆管上皮细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于大鼠肝外胆管上皮细胞的体外培养。
DMEM低糖 (含L-丙氨酰-L-,不含钠)500mL-
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M199(含HEPES)500mL-
RK1细胞专用培养基125mL×4RK1细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持RK1细胞佳的生长状态。本产品中已包含RK1细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于RK1细胞的体外培养。