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大鼠支气管成纤维细胞

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:266

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 支气管组织
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详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠支气管成纤维细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

支气管组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自支气管组织;支气管(Bronchi),是指由气管分出的各级分枝,由气管分出的一级支气管,即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较,前者较细长,走向倾斜;后者较粗短,走向较前者略直,所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是,气管是以“C"型的气管软骨为支架,而支气管不是。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。支气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

5.方法简介:

实验室分离的采用胶原 - 胰联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  成纤维细胞样

传代特性  可传5代左右;3代以内状态佳

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大?。?/span>
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Artemin抗体 C型凝集结构域家族6成员A封闭多肽 

磷化微管相关蛋白抗体 脑纳前体封闭多肽 

GEN1蛋白抗体 肝癌缺失基因1/2封闭多肽 

交叉蛋白1抗体 细胞周期蛋白依赖性激抑制剂2C封闭多肽 

监理蛋白抗体 乙醇脱氢1封闭多肽 

FAM96B蛋白抗体 神经元钙结合相关蛋白EFCBP1封闭多肽 

精子发生相关蛋白7抗体 毒蕈碱型乙酰受体封闭多肽 

白介-17B受体抗体 6号染色体开放阅读框201封闭多肽 

锌指蛋白101抗体 单氨氧化A+B封闭多肽 

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian G蛋白偶联受体GPR85蛋白封闭多肽 

锌指蛋白828抗体 磷化神经性舞蹈病蛋白封闭多肽 

软脂?;椎鞍?/span>Sprouty1抗体 味觉受体蛋白家族2亚基50封闭多肽 

丙型肝炎病毒-NS4a抗体 磷化血清应答因子封闭多肽 

X染色体开放阅读框6抗体 固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白封闭多肽 

紧密连接蛋白14抗体 NYNRIN封闭多肽 

光导蛋白样蛋白PDCL3抗体 KIAA1161蛋白封闭多肽 

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 谷氧还蛋白/巯基转移封闭多肽 

轴突生长诱导因子3抗体 6号染色体开放阅读框120封闭多肽 
大鼠支气管成纤维细胞L-英文名称:L-GAlutamine(200 mM)100mL

L-丙酰胺-L-英文名称:L-Alanyl-L-Glutamine (200mM)100mL

氢化英文名称:氢化5g

嘌呤霉英文名称:puromycin25mg

(还原型)英文名称:5g

碳氢钠溶液(7.5% )iCell-01300英文名称:Sodium bicarbonate100mL

胰岛-转铁蛋白-硒添加剂英文名称:(ITS-G)100X10mL

 


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