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自身免疫調(diào)節(jié)因子ELISA試劑盒操作
閱讀：162 發(fā)布時間：2020-2-21| 提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 5KB |
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自身免疫調(diào)節(jié)因子ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
12nmol/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
6nmol/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
3nmol/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5nmol/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
0.75nmol/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍（48T的20倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
自身免疫調(diào)節(jié)因子ELISA試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月