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                                  犬Ⅳ型膠原（Col Ⅳ）檢測試劑盒樣品收集方法

 

十二月，我想起那年周末我常常出現(xiàn)在阿纖家，在寒冷的天氣，我?guī)е弊?，戴著圍巾，拿著討厭的?shù)學(xué)卷子聽阿纖耐心的講，講得我自己都覺得不好意思再問一遍。十二月，我記得我陪著一個女孩在操場哭了一個晚自習(xí)，她的眼淚，浸濕我的圍巾，她倔強的說不要上課。我們傻傻的站在那里，不知道是那年的風(fēng)太大還是那時候的操場好冷，我覺得自己已經(jīng)那木了站在那里。接下來介紹 犬Ⅳ型膠原（Col Ⅳ）檢測試劑盒樣品收集方法。

 

 

樣品收集:

 

1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。

 

2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。

 

3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

 

4. 細胞培養(yǎng)上清：取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。

 

5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測

 

6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

 

7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融。

 

8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù)）。