详细介绍
参数规格:
产品货号:FS-P013523
产品规格:50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
Langerin/CD207/FITC 荧光标记白细胞分化抗原CD207抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPA-1/SIPA-1 荧光标记抗信号感应增殖相关蛋白 1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP2 蛋白激A2抗体 0.2ml
Rabbit horse IgG/Bio 生物标记的兔抗马IgG 0.1ml
Granzyme B 颗粒B抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7标记的兔抗羊IgM 0.1ml
SPA-1/SIPA-1 荧光标记抗信号感应增殖相关蛋白 1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳脱氢Multi-class antibodies: 48T
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗体Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-10 白细胞介-10抗体 0.1ml
BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7 96T
Protein CASP CASP抗体 0.1ml
CK1 细胞角蛋白1抗体 0.1ml
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗体Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/RBITC 罗丹明标记的驴抗人IgG 0.1ml
GCP4 γ-微管蛋白GCP4抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMCX1 ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体 0.2ml
IGF-II/FITC 荧光标记胰岛样生长因子-II抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG 兔抗猴IgG 1mg
Plexin A2/FITC 荧光标记神经丛蛋白A2抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人疱疹病毒6型染料法荧光定量PCR试剂盒50次链霉菌种属: Streptomyces│sp.分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
伤寒沙门氏菌种属: Salmonella│typhi提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no培养基: CM0051生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
多粘类芽孢杆菌种属: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0002生长条件: 28-32℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
微黄色奈瑟氏菌种属: Neisseria│subflava提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no培养基: CM0109生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
蛋白解诱导因子/皮离蛋白(PIF/DCD)ELISA试剂盒2,4-二甲基-1- 99%长春质 分析标准品,≥98%孔雀绿
蛋白激活复合体亚基2(PSME2)ELISA试剂盒3,4-二 99%三氧化钼 99.95%聚乙二2000
蛋白3特异性抗中性粒胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒4-硝基邻二甲 99%三氧化钼 99.95%,100nm硫代氨基脲(AR)
蛋白3抗体(PR3Ab)ELISA试剂盒3-硝基邻二甲 99%二硫化钼 AR,99%化亚铁四(AR)
蛋白3(PR3)ELISA试剂盒草高铁铵 98%钼粉 99.5% metals basis,2μm乌来糖;氨乙酯
蛋白1调控/抑制因子亚基1A(PPP1R1A)ELISA试剂盒硫亚铁铵,六 AR,99.5%砷 99.995% metals basis钼
蛋白(PP)ELISA试剂盒硫高铁铵,十二 AR,99.0%砷标准溶液 浓度范围:0.444(mg/L) ±0.028mg/L酮激
蛋白酪氨1B(PTP1B)ELISA试剂盒乙基纤维 电子级对氨基胂 98%甲磺依普罗沙坦;依普沙坦
蛋白酪氨(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒鞣花 96%对氨基胂 分析标准品盐甲脒
蛋白酪氨激(PTK/CD115)ELISA试剂盒没食子乙酯 98%三氧 AR(剧品)化铬;三化铬
蛋白酪氨激(PTK)ELISA试剂盒荧光 IND三氧 CP(剧品)肌一
蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒柠檬铁 AR三氧 PT(剧品)右旋糖苷/葡聚糖10
蛋白聚糖(PG)ELISA试剂盒柠檬铁 培养级三氧 99.99%(剧品)三(羟甲基)氨乙盐
蛋白精氨脱亚氨4(PADI4)ELISA试剂盒硫铁 AR,Fe 21-23 % 98%(剧品)柠檬铁铵
蛋白精氨甲基转移1(PRMT1)ELISA试剂盒硫亚铁,七 ACS, ≥99.0%亚钠 99.99%(剧品)化
蛋白激C(PKC)ELISA试剂盒石蕊 AR亚钠 CP(剧品)D-葡萄糖内酯