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phospho-IRS

中文名称：CDK抑制剂(SNS-032)

注意事项：

1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

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英文名称： Dodecyl 2-methylacrylate；Lauryl methacrylate

其他英文名称： 2-Methyl-2-propenoic acid dodecyl ester

产品规格： AR

包　　装： 25毫升/100毫升/500毫升/1升

CAS号：142-90-5

C16H30O2=254.41

级别：AR

含量：≥96.0%(GC)

密度(20℃)：0.872～0.876g/ml

折光率：1.444～1.447

性状：无色至浅黄色液体。含300 - 500 ppm MEHQ稳定剂。不溶于水，溶于有机溶剂，光照易聚合。良好疏水性，易于发生聚合反应，柔韧性佳

用途：生化研究。原油降凝剂、织物整理剂、皮革助剂、内增塑剂、吸油树脂、具有"温度开关"特性的智能材料、增稠剂、复鞣加脂剂、流平剂粘合剂、除臭剂、润滑油添加剂、皮革和纤维的整理剂、纸张涂饰剂、油墨、涂料、医药等添加剂

保存：RT

操作规程：

1、在96孔板加入细胞00μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入00微升5000～0000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～0μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)