详细介绍
中文名称:细胞增殖示踪荧光探针
英文名称:CFDA, SE
产品规格:25mg
发货周期:1~3天
CFDA, SE,英文全称Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。 CFDA, SE是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)的衍生物,具细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。 |
CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。本品以粉末形式提供,需用DMSO制备储存液后再使用。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)
状腺结合球蛋白(TBG)elisa试剂盒英文名称:TBG ELISA Kit19号染色体开放阅读框61抗体包装5g
状腺激受体交互子6(TRIP6)elisa试剂盒英文名称:TRIP6 ELISA Kit19号染色体开放阅读框77抗体包装100g
状旁腺受体2(PTHR2)elisa试剂盒英文名称:PTHR2 ELISA Kit核DNA结合蛋白C1D抗体包装25g
胎蛋白(αFP)elisa试剂盒英文名称:αFP ELISA Kit1号染色体开放阅读框58抗体包装25g
基CpG结合蛋白2(MECP2)elisa试剂盒英文名称:MECP2 ELISA Kit21号染色体开放阅读框66抗体包装5g
己糖激1(HK1)elisa试剂盒英文名称:HK1 ELISA KitCDC42效应蛋白3抗体包装25g
几丁质1(CHIT1)elisa试剂盒英文名称:CHIT1 ELISA Kit7号染色体开放阅读框43抗体包装5g
激肽原1(KNG1)elisa试剂盒英文名称:KNG1 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
激肽释放7(KLK7)elisa试剂盒英文名称:KLK7 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装5g
激肽释放5(KLK5)elisa试剂盒英文名称:KLK5 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装10MG
激肽释放4(KLK4)elisa试剂盒英文名称:KLK4 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
激肽释放3(KLK3)elisa试剂盒英文名称:KLK3 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装5g
激肽释放1(KLK1)elisa试剂盒英文名称:KLK1 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装100g
激活AB(ACVAB)elisa试剂盒英文名称:ACVAB ELISA Kit尾部结构蛋白抗体包装25g
激活A(ACVA)elisa试剂盒英文名称:ACVA ELISA Kit5号染色体开放阅读框19抗体包装5g
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 质量规格:含量> 99%脂多糖结合蛋白试剂盒异七叶皂苷Ia;Isoescin Ia
根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格:含量> 99%,BR,可用于培养脂多糖/内试剂盒异紫堇定碱;(+)-Isocorynol
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格:HPLC>98%,标准品脂蛋白磷脂A2试剂盒24-乙酰泽泻A;Alisol A 2
细胞增殖示踪荧光探针乙-β-萘酯
其他乙-2-萘酯;醋-β-萘酯;乙2-萘基酯;β-乙萘酯;2-萘基乙酯;醋-2-萘酯;β-萘基乙酯
英文名称:β-Napthyl acetate
其他英文名称:2-Napthyl acetate
产品规格:CP
包 装: 25克
CAS号:1523-11-1
C12H10O2=186.21
级别:CP
熔点:68~71℃(熔程2℃)
乙溶解试验:合格
灼烧残渣:≤0.1%
性状:浅红色针状结晶。对湿敏感。易溶于乙和,微溶于水。熔点70℃
性状:至绿色或黄色薄片或粉末。能溶于水、乙和,水溶性280g/L(20℃),毒性LD50(mg/kg):大鼠经口LD50为1100,动物实验有致癌及致畸作用,密度: 1.138
用途:生化研究。非选择性除草剂及用于蛋白质中色的测定。农药分析标准样品
保存:RT