详细介绍
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
50T|100T | 1~3天 |
商品介绍:
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 |
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。
AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得Annexin V 与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。
检测原理:
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。
Annexin-Ⅴ能与PS 高亲和力结合??赏ü赴獠啾┞兜牧字K堪彼嵊氲蛲鲈缙谙赴陌そ岷?。用标记了PE的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-PE。
Annexin V-PE 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是7-AAD。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,7-AAD 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
7-AAD/Annexin V-PE试剂盒将AnnexinⅤ与7-AAD匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来?;邓老赴梢酝庇階nnexin V-PE和7-AAD 结合显色,而7-AAD 则被排除在活细胞(PE阴性)和早期凋亡细胞(PE阳性)之外。在没有巨噬细胞的情况下,凋亡的后阶段会像细胞坏死一样发生整个细胞的解体,从而使凋亡晚期的细胞也同时被PE和7-AAD 结合染色呈现双阳性。
储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;长期不用-20℃保存。
Annexin V-PE染色液避免反复冻融,冻融2次以上可能会失效。长期保存分装后-20℃保存。
有效期:一年。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
盐洛美利英文名称: Lomefloxacin HCl结合转化激活因子CITED1抗体包装10MG
盐马尼地平英文名称: Lomefloxacin HClⅡ型胶原α1蛋白/软骨钙抗体包装100mg
盐美西律(慢心率)英文名称: Loteprednol EtabonateCSMD2蛋白抗体包装500mg
盐尼非卡兰英文名称: Loteprednol EtabonateCSMD3蛋白抗体包装1g
盐尼卡地平英文名称: Lovastatin,Monacolin K钙调神经磷CSTP1抗体包装250mg
盐普拉格雷英文名称: Lovastatin,Monacolin KCTAGE6蛋白抗体包装1g
盐普鲁卡因英文名称: Lubiprostone皮肤T淋巴瘤相关抗原4抗体包装1g
盐曲美他英文名称: Lypressin Acetate膜蛋白CLDND2抗体包装25g
盐索他洛尔英文名称: Matrixyl Acetate含半胱和组丰富域蛋白1抗体包装5g
盐特拉唑英文名称: Meclofenoxate HCl猪圆环?、蛐鸵驴堑鞍装?g
盐替罗非班英文名称: Meclofenoxate HCl抗菌肽CAMP抗体包装1g
盐维拉帕米英文名称: Megestrol Acetate卷曲螺旋结构域蛋白134抗体包装5g
依那普利拉英文名称: Megestrol Acetate卷曲螺旋结构域蛋白69抗体包装1g
依普利酮英文名称: Melanotan ⅡAcetate卷曲螺旋结构域蛋白98抗体包装5g
*贝特英文名称: Meloxicam卷曲螺旋结构域蛋白70抗体包装1g
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BR循环免疫复合物试剂盒盐药根碱;Jatrorrhizine
黄曲霉Aspergillus│flavus 质量规格:>98%血影蛋白试剂盒银杏内酯C;Ginkgolide C
细脚拟青霉Paecilomyces tenuipes 质量规格:>98%,标准品血血小板衍生生长因子可溶性受体α试剂盒叶;Folic acid
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒氧化铁
其他 三氧化二铁;红色氧化铁;氧化高铁;205铁红;磁性氧化铁红;烧褐铁矿;铁丹;红粉;威尼斯红
英文名称: Iron(III)oxide
其他英文名称: Ferric oxide;Iron oxide red;Red iron trioxide
产品规格: 4N
包装:10克
产品规格: AR,99%
包装:500克
CAS号:1309-37-1
Fe2O3=159.69
级别:4N
含量:≥99.99%
级别:AR
含量:≥99.0%
盐不溶物:≤0.02%
重金属(以Cu计):≤0.01%
水溶物:≤0.1%
硫化铵不沉淀物:≤0.2%
总氮量:≤0.005%
硫盐:≤0.08%
性状:紫棕色粉末。溶于,不溶于水。相对密度5.12~5.24。熔点1565℃。小致死量(狗,皮下)30mG/kG。有刺激性
用途:生化研究。分析试剂。催化剂。抛光剂。颜料配制。玻璃滤片(绿色)着色。铁氧体
保存:RT
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。