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产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Collagenase III | 100mg | 1~3天 |
商品介绍:
本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。 本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维?;购衅渌囊恍┑鞍酌?、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。 |
胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:
1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;
2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;
3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;
4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
分子量:68-130 kDa
激活剂:Ca2+、Zn2+
抑制剂:EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum
活力单位:在37℃,pH7.5 的条件下,5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件:4℃避光,有效期两年
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
洛莫司?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗体包装1g
洛匹那韦(标准品)英文名称: Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趋化因子受体2抗体包装100g
洛索洛芬钠(标准品)英文名称: Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制剂B抗体包装25g
麻保沙星;马波沙星(标准品)英文名称: Ganciclovir趋化样蛋白抗体包装5g
马来地平(标准品)英文名称: Ganciclovir角蛋白20抗体包装100g
马来吡汀(标准品)英文名称: 5,6-Dimethoxy-1-indanone钙激活的中性蛋白2抗体包装25g
马来伏沙明(标准品)英文名称: PaeoniflorinCD45RO抗体包装100g
马来桂哌齐特(标准品)英文名称: Paeoniflorin嗜中性??乖瑿D177抗体包装25g
马来那敏/扑尔敏(标准品)英文名称: Paeoniflorin钙整合结合蛋白1抗体包装5g
马来曲美布?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Paeoniflorin21号染色体开放阅读框7抗体包装100g
马来噻吗洛尔(标准品)英文名称: Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受体抗体包装25g
马来替加色罗(标准品)英文名称: 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受体抗体包装5g
马来溴那敏(标准品)英文名称: 5-HTP磷化巨噬集落激因子受体抗体包装1g
马来依那普利(标准品)英文名称: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受体抗体包装5g
吗多明(标准品)英文名称: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受体抗体包装25g
小单孢菌Micromonospora│sp. 质量规格:>98.5%,USP色c氧化亚基5A,线粒体试剂盒土荆皮乙;Pseudolaric Ac
马尔他布鲁氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 质量规格:HPLC>99%,标准品色c氧化Ⅵα亚基多肽1试剂盒塔拉萨敏;Talatisamine
: =LMG27494T=CGMCC1.12516T资源名称: 芽孢八叠球菌 质量规格:>98%,BR,可用于培养色C氧化试剂盒天麻;Gastrodin
胶原酶III型亚磷三乙酯
其他 三乙基亚磷酯;三乙氧基膦
英文名称: Triethyl phosphite
其他英文名称: Phosphorous acid triethyl ester
产品规格: AR,98%
包 装: 100毫升
CAS号:122-52-1
C6H15O3P=166.16
级别:AR
含量:≥98%
折光率:1.412~1.414
性状:无色液体。对湿敏感。能与乙、 、混溶,不溶于水。相对密度0.9687。沸点 156.6℃。闪点 54℃。易燃。 有刺激性
用途:生化研究。有机合成。增塑剂。稳定剂。润滑油脂的添加剂。
保存:RT
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。