详细介绍
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)
中文名称:支原体检测试剂盒
英文名称:Mycoplasma Detection Kit
产品规格:100T-200T
发货周期:1~3天
本试剂盒是利用荧光染料检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。Hoechst 33258的大激发波长为346nm,大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,大激发波长为352nm,大发射波长为461nm。 |
操作步骤:
贴壁细胞:
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2×104。同时,接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。
2.5天后,先吸去培养液,再加入1ml的固定液,静置20min,
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15-20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入一滴封片液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
悬浮细胞:
1.收集需检测的细胞,1500rpm,5min。
2.将收集的细胞涂片于载玻片上,再加1ml的固定液,静置20min。
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15~20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,用无菌水洗涤玻片3次,直接风干。风干后加入一滴封固液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa试剂盒英文名称:8-OHdG ELISA Kit1号染色体开放阅读框194抗体包装1g
70kDa热休克蛋白8(HSPA8)elisa试剂盒英文名称:HSPA8 ELISA Kit1号染色体开放阅读框198抗体包装25g
70kDa热休克蛋白5(HSPA5)elisa试剂盒英文名称:HSPA5 ELISA Kit1号染色体开放阅读框21抗体包装5g
70kDa热休克蛋白1A(HSPA1A)elisa试剂盒英文名称:HSPA1A ELISA Kit1号染色体开放阅读框216抗体包装1g
60kD热休克蛋白(HSPD1)elisa试剂盒英文名称:HSPD1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框43抗体包装25g
5羟色胺转运蛋白(SERT)elisa试剂盒英文名称:SERT ELISA Kit1号染色体开放阅读框50抗体包装5g
5-羟色胺(5-HT)elisa试剂盒英文名称:5-HT ELISA Kit1号染色体开放阅读框49抗体包装1g
5-羟基吲哚乙(5-HIAA)elisa试剂盒英文名称:5-HIAA ELISA Kit1号染色体开放阅读框53抗体包装5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)elisa试剂盒英文名称:NUP50 ELISA Kit1号染色体开放阅读框54抗体包装1ml
27kDa热休克蛋白(HSPB1)elisa试剂盒英文名称:HSPB1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框55抗体包装5g
25-羟基维生D3(HVD3)elisa试剂盒英文名称:HVD3 ELISA Kit1号染色体开放阅读框56抗体包装100g
25kDa突触关联蛋白(SNAP25)elisa试剂盒英文名称:SNAP25 ELISA Kit1号染色体开放阅读框65抗体包装25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)elisa试剂盒英文名称:NUP210 ELISA Kit1号染色体开放阅读框64抗体包装100g
20S-蛋白体(20S-PSM)elisa试剂盒英文名称:20S-PSM ELISA Kit1号染色体开放阅读框69抗体包装25g
2',5'-寡腺苷合成1(OAS1)elisa试剂盒英文名称:OAS1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框77抗体包装500g
马氏副球菌Paracoccus│marcusii 质量规格:>99%,BR,三合物胰脂肪试剂盒异槲皮苷;Isoquercitrin
海假交替单胞菌Pseudoalteromonas│marina 质量规格:HPLC>98%,标准品胰抑制试剂盒异鼠李-3-O-新橙皮苷;Isorha
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格:>99%,BR胰腺癌标志物CA242 elisa试剂盒原苏木B;Protosappanin
支原体检测试剂盒一缩二乙二
其他 二甘;二乙二;双甘;2,2'-氧代二乙
英文名称: Diethylene glycol
其他英文名称: β,β′-Dihydroxydiethyl ether;Diglycol;2,2′-Oxybisethanol; 2,2′-Oxydiethanol
产品规格: 色标
包装:2毫升
产品规格: 色固
包装:25毫升
产品规格: CP
包装:500毫升
CAS号:111-46-6
C4H10O3=106.12
级别:GCS
级别:色固
级别:CP
沸程:241~248℃
密度(20℃):1.115~1.118g/ml
度(以H+计):≤0.34 mmol/100g
折光率(n20D):1.446~1.448
灼烧残渣:≤0.01%
性状:无色粘稠液体。无气味。微带甜味。易吸湿。能与乙、酮、乙二混溶,几乎不溶于。相对密度(d2020)1.118。熔点-6.5℃。沸点 244~245℃。折光率(n20D)1.4475。闪点(开杯)143℃。半数致死量(大鼠,经口)20.76g/kg。有刺激性
用途:生化研究。溶剂。萃取剂。气体脱水剂。软水剂。防冻剂。润滑剂。气相色谱固定液(高使用温度50℃),适用于水溶液分析,选择性与聚乙二相似,用于分析含氧化合物(特别是)、胺、脂肪胺、吡啶和喹啉。
保存:RT