技术文章
细胞培养实用技巧小结
阅读:226 发布时间:2022-11-7细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出,然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离,也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。
一、细胞培养实用技巧:
1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。
3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。
二、细胞培养的应用:
细胞培养是细胞和分子生物学所使用的一项重要技术,为细胞正常生理和生化研究 (如代谢研究、衰老研究)、药物和毒性化合物对细胞的作用、以及致突变性和致癌性研究提供了上佳的模型系统。
细胞培养还可用于药物筛选和开发,以及生物化合物(如疫苗、治疗性蛋白质)的大规模。在这些应用中,使用细胞培养的一大优势在于,使用来源于同一克隆的一批细胞可获得稳定一致、可重复的结果。这也许是细胞培养的最主要应用场景。